中文摘要：

本课题组前期采用分子标记及HEGS(High Efficiency Genome Scanning)电泳技术，通过对水稻PiNO4和农林22、CO39和Reiho 2个分离群体的分析，已将水稻稻瘟病真性抗性基因Pita-2 精细定位在约75kb的片段上。本研究对以 Pita2位点最近的侧翼标记所界定的约75 kb区域日本晴的序列作为参考，通过3种基因预测注释软件进行了候选基因的预测和注释分析，确定了5个Pita2的候选基因；对5个候选基因进行表达分析，证明其中3个候选基因是可以表达的功能基因；采用LD-PCR技术从抗病亲本扩增候选基因，并与pCAMBIA1305载体进行连接，构建植物双元表达载体；利用供体品种PiN0.4的总RNA，反转录后，构建候选基因的RNAi干涉载体；采用农杆菌侵染受体（PiN04、台北309和日本晴）胚性愈伤组织，筛选转化植株，并对转基因植株进行抗性鉴定，确定抗性基因。本课题对研究水稻稻瘟病抗性基因Pita-2的广谱高抗机理及进化的分子机理具有重要的理论意义，对开发Pita-2特异分子标记、加快着丝粒相关区段基因资源的有效利用具有重要的应用价值。