中文摘要：

丙型肝炎病毒非结构蛋白3（HCV NS3）与肝癌发生密切相关，但其致癌机理仍不清楚。我们前期研究表明NS3能诱导肝细胞恶性转化，并增强酪氨酸磷酸化蛋白及其调控的ERK1/2信号通路分子表达，提示酪氨酸磷酸化信号转导通路在NS3致病中起重要作用。因此本项目以NS3恶性转化的肝细胞为切入点，利用蛋白质组学技术结合免疫印迹方法研究酪氨酸磷酸化蛋白质组，筛选、鉴定与NS3 转化相关的酪氨酸磷酸化蛋白；同时通过激酶活性测定、显性负性突变体阻断及凝胶电泳迁移实验等深入研究NS3对ERK1/2信号通路的影响，确定其靶蛋白；生物信息学模拟NS3作用的酪氨酸磷酸化信号转导网络，并对关键蛋白进行特异性验证。多种方法联合应用，全面、深入探讨酪氨酸磷酸化信号转导网络在NS3致癌机理中的作用，为探索以干预信号转导途径重要靶分子为目标的肝癌防治策略提供实验和理论依据。

结论摘要：

丙型肝炎病毒非结构蛋白3（HCV NS3）与肝癌发生密切相关，但其致病机理仍不清楚。我们前期研究表明NS3能诱导肝细胞恶性转化，并增强酪氨酸磷酸化蛋白及其调控的ERK1/2信号通路分子表达，提示酪氨酸磷酸化信号转导通路在NS3致病中起重要作用。因此本项目以NS3恶性转化的肝细胞为切入点，利用蛋白质组学技术结合免疫印迹方法研究酪氨酸磷酸化蛋白质组，筛选、鉴定与NS3 转化相关的酪氨酸磷酸化蛋白；同时选取酪氨酸蛋白激酶11（LKB1）为研究目标，探讨NS3通过影响LKB1信号转导通路导致肝癌对化疗药物的敏感性改变的可能性。再次通过microRNA芯片分析NS3转染前后肝细胞miRNA表达谱的影响，进一步探讨NS3致癌机理，为探索以干预信号转导、小分子RNA等重要靶分子为目标的肝癌防治策略提供实验和理论依据。