我国目前面临着能源短缺与大量石油资源未能有效开发的突出问题。内源微生物驱油技术是通过调整油层内部固有微生物群落的代谢关系和生物活性来增加原油采出程度的一种新的微生物采油技术。油藏微生物群落结构及其在影响因子作用下的动态变化的研究,能为内源微生物采油技术的应用提供十分重要的信息,对于微生物采油技术的改进和采油效果的提高有巨大的意义。本研究工作拟运用分子生态学方法(PCR-DGGE)和培养方法对克拉玛依油田的油藏微生物多样性进行分析,对油井在激活剂作用下微生物群落结构的动态变化进行监测,以更精确的揭示克拉玛依油田油藏微生物的种类和遗传多样性,确定最佳激活剂配方;同时,结合内源微生物驱油室内物理模拟实验对克拉玛依油田实施内源微生物采油的潜力做出评价,为该油田内源微生物采油技术现场试验提供理论依据。
indigenous microorganism;activator;evaluating;DGGE;physical simulation experiment
内源微生物采油技术是一项新兴的提高原油采收率的高新技术。但油藏微生物分子生态的研究限制了这项先进技术的发展和广泛应用。本项目采用最大可能数法( MPN) 和变性梯度凝胶电泳( DGGE)对克拉玛依油田93#井内源微生物的组成进行了分析。在对克拉玛依油田93#井内源微生物群落结构分析的基础上,以内源微生物选择性激活剂配方筛选为重点,通过物理模拟驱油试验对内源微生物采油技术进行了较为系统的研究,为该区块实施内源微生物采油技术奠定了基础。具体研究内容如下 采用不同激活剂对油藏微生物进行了选择性激活,对激活后的腐生菌、产甲烷菌、反硝化细菌、硫酸盐还原菌、硫细菌、铁细菌数量进行了检测,同时以变异系数为指标对激活效果进行评价,并结合原油降解率及降黏率进行了验证;在单因素实验基础上,将响应面分析法应用到激活剂体系各因素的优化组合中;在对油藏状况分析的基础上,通过分析国外内源微生物物理模拟驱油实验,针对克拉玛依油田93#井原油和原生水模拟地层条件,进行了内源微生物物理模拟驱油实验研究,结果表明具备实施内源微生物采油的潜力。 除此之外,1、在实验室模拟的条件下,利用从克拉玛依的石油污染土壤中筛选出的4 株高效降解菌,以石油烃降解率、脱氢酶活性、呼吸强度、微生物量碳氮和土壤毒性作为评价指标,研究了6 种不同实验条件对石油污染土壤修复的效果。2、以菲为研究对象,从克拉玛依稠油污染土壤中筛选到1株对菲具有较好降解效果的菌株Y-8,并对其降解特性进行了初步研究。3、采用芘平板升华法对克拉玛依原油污染土壤样品进行驯化培养,分离得到一株芘降解菌B2,经16SrDNA基因序列比对及系统发育进化分析表明,该菌株为假单胞菌属(Pseudomonas)。采用正交设计方法优化菌株B2对高分子量多环芳烃芘的降解条件,并构建多元非线性模型预测菌株B2对芘的最佳降解条件。运用PCR技术克隆B2的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(B2C23O)(I.2.A亚家族)。