在抑制性差减杂交、反向Northern、半定量RT-PCR以及Northern blot的结果基础上,我们认为Reg IV是一个在结直肠腺瘤中高表达的基因。原位杂交结果进一步证实Reg IV 的高表达是结直肠癌发生的早期事件。Reg IV 在结直肠癌前病变(腺瘤、溃疡性结肠炎)中表达明显上调。但Reg IV及家族基因在癌发生中的机制至今研究甚少。有必要深入研究Reg IV 在癌发生中的确切作用,Reg IV及其类似物是否可用于癌的早期检测,是否可以作为抗癌治疗的早期靶点,从而确定其下游作用靶点,明确其在癌发生中的作用方式,为其在癌中的作用作出初步结论,为Reg IV在结直肠癌中的诊断、治疗和预防的应用提供分子生物学基础。在此基础上,可深入研究Reg家族参与的信号转导通路,研究它们与细胞周期的关系,并明确它们与细胞的生长、分化调控的关系。
RegIV基因在肠癌发生中的作用和机制研究甚少。我们应用RT-PCR、转染、SOE-PCR、Western-blot和免疫组化等观察RegIV基因对RegIV阴性表达的LoVo细胞的生物学行为的影响。结果表明①RegIV转染后的LoVo细胞c-myc表达较转染前的LoVo细胞明显下调;②RegIV转染后LoVo细胞增殖活性弱于转染前,但转染前后细胞侵袭力无显著改变;③bcl-2在RegIV转染前后的LoVo细胞中表达阴性;而在5-FU较高浓度下,转染后LoVo细胞bcl-2表达较转染前明显增强,提示RegIV可能对5-FU 诱导LoVo细胞凋亡有较强的拮抗作用;④LoVo细胞经pcDNA3.1-RegIV-domain△转染后的细胞增殖活性明显减弱;经转染缺失CRD结构域RegIV后的细胞增殖活性与空质粒转染组、对照组无明显差异。转染前后LoVo细胞侵袭力无显著差异。提示RegIV 基因CRD结构域可能与细胞增殖和凋亡有关;⑤RegⅣ蛋白在癌旁、腺瘤和癌组织的阳性表达率间有明显差异。其表达水平与大肠癌临床进展无显著相关性;与P53蛋白表达水平无明显相关性。