中文摘要：

中文主题词Pdx-1；胰岛素；HepG2细胞；横向分化；

结论摘要：

本研究建立了一种能稳定表达PDX-1基因的细胞系PDX-1+HepG2，并观察其在体外或移植到体内后是否能向胰岛素分泌细胞分化。首先从人胰腺cDNA文库中扩增PDX-1基因的全长编码区，将pcDNA3-PDX-1真核表达质粒稳定转染人源肝细胞癌细胞系HepG2，获得了PDX-1+ HepG2细胞系。用RT-PCR检测PDX-1+ HepG2细胞系胰岛分化标志基因胰岛素、葡萄糖激酶、葡萄糖转运蛋白2、生长抑素未表达，分析发现可能是由于该细胞系缺乏胰岛素基因启动所需的转录因子Isl-1和NeuroD1之故。为了继续检验体内微环境肾包囊腔是否对PDX-1+ HepG2有诱导分化作用，将该细胞移植入STZ诱导的糖尿病裸鼠肾包囊下（n=16）。结果表明该组动物的血糖水平与移植HepG2的对照组动物（n=7）无统计学差异。免疫组织化学分析表明移植细胞增殖旺盛，且仍然稳定表达PDX-1，未检测到胰岛素分泌细胞的出现。以上实验结果表明， 单纯PDX-1不足以诱导HepG2细胞向胰岛内分泌细胞分化，而在Isl-1和/或NeuroD1的共同协同下可能启动内源性胰岛素基因表达。