按照原定计划,以钠泵α1亚单位膜外区M1-M2和M3-M4蛋白为靶标,经过3轮淘选,并通过ELISA分析,从噬菌体随机十二肽库中筛选到2个阳性克隆,与钠泵具有一定的结合能力,可以部分阻断哇巴因对钠泵的抑制作用;全细胞膜片钳实验表明,在高浓度哇巴因条件下,钠泵结合肽可以部分缓解哇巴因对钠泵电流的抑制作用,但该钠泵结合肽对哇巴因刺激血管内皮细胞增殖和凋亡影响不明显;哇巴因(0.1μmol/L)可以使细胞内[Ca2+]浓度升高,当同时加入哇巴因和结合肽(1μmol/L, 10μmol/L, 50μmol/L)孵育时,细胞内[Ca2+]浓度呈剂量依赖性降低;钠泵结合肽高剂量组(1mg/kg)给药时,可使高血压大鼠动脉血压下降22%。这些实验结果表明,从肽库中筛选到的钠泵结合肽能够拮抗哇巴因对钠泵的结合,从而缓解哇巴因对钠泵的抑制作用,并降低哇巴因导致的细胞内钙水平升高,对高血压大鼠的血压也有一定程度的降低,因此,有必要进行更深入的研究,以探讨该结合肽在高血压的治疗中的应用。
英文主题词sodium pump; conjugated peptide; phage-displayed random peptide library; ouabain; hypertension