中文摘要：

本项目利用人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因启动子的转录活性仅见于端粒酶阳性细胞如肿瘤细胞这一特异，构建hTERT基因启动子调控Fas相关死亡结构域蛋白（Fas-associated death domain protein,FADD）基因表达载体，再转染入人结肠癌细胞，观察人结肠癌细胞端粒酶活性、细胞周期及凋亡情况。进

结论摘要：

本项目分两部分第一部分是从惠赠质粒phTERTp-Luc从获得hTERT基因启动子序列，再利用逆转录病毒载体，经过多次双酶切、回收纯化、连接，JM109菌株转化，氨苄抗性菌落筛选，构建hTERT基因启动子调控的含有绿色荧光蛋白报告基因的表达载体pLNCX-hTERT-GFP和含有凋亡基因FADD的表达载体pLNCX-hTERT-FADD,并通过测序仪序列分析、酶切和hTERT基因启动子转录活性分析鉴定。鉴定表明所构建的表达载体是成功的。第二部分，构建的上述表达载体再转染入人结肠癌细胞和直接注射入事先建立人结肠癌裸鼠模型，观察表达载体的效应。结果表明所构建的表达载体pLNCX- hTERT-FADD能影响人结肠癌细胞的细胞周期，诱导细胞凋亡，抑制裸鼠肿瘤生长，而对正常细胞无此作用。综合两部分结论，表明hTERT基因启动子调控治疗基因表达是一种很有希望的肿瘤靶向基因治疗策略。