中文摘要：

大肠癌是我国常见的发病率呈明显上升趋势的恶性肿瘤之一。大肠癌干细胞在其浸润转移中起重要作用。然迄今对大肠癌干细胞的特征性分子机制尚待深入。本项目研究目的是通过逆转录病毒文库和全基因表达差异谱芯片技术，结合体内外细胞侵袭试验，以Akt、MAPK、Wnt、Notch和Hedgehog信号通路为主要研究对象，筛选和鉴定与大肠癌干细胞转移潜能相关的关键功能靶蛋白及其调控分子。首先用抗体磁珠技术从原代大肠癌组织和培养大肠癌细胞系中分离出CD133+细胞，经干细胞特性验证和建立大肠癌干细胞分选流程后，提取总RNA建立人大肠癌干细胞样细胞cDNA/pLNCX2 逆转录病毒文库，通过感染普通大肠癌 SW480 细胞系和 MACS 去边缘细胞的体外培养大肠癌细胞，分别接种 Transwell 和NOD/SCID 裸鼠的方法筛选转移相关候选基因。最后，用PCR、DNA测序和全基因表达差异谱芯片的方法筛选和验证转移相关候选基因，并进行验证。本项目通过构建重组逆转录病毒文库的方法可有效从大肠癌中筛选出大肠癌转移相关基因；已鉴定出数个功能未明且与大肠癌干细胞转移潜能相关的关键功能靶蛋白。