中文摘要：

为了探讨缺血诱导因子HIF-1α特异性dsRNA对视网膜新生血管潜在的基因治疗途经，本研究拟将已构建的HIF-1α基因特异性dsRNA重组质粒pSUPER-dsRNA928经脂质体转染鼻咽癌细胞(CNe2)，采用Luciferase报告基因测定HIF-1α的活性，Werstern blot、免疫细胞化学技术分析HIF-1α以及VEGF蛋白质的表达差异。然后将pSUPER-dsRNA928包裹于脂质

结论摘要：

视网膜新生血管性疾病是主要的致盲性眼病。血管内皮生长因子（VEGF）是促使新生血管形成的关键因素，在缺氧环境中主要受缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）调控。本研究的目的在于探讨针对HIF-1α和VEGF的小片段干扰性RNA（siRNA）体外对鼻咽癌细胞（CNE-2）和人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）HIF-1α和VEGF表达的抑制作用及体内对小鼠视网膜新生血管的抑制作用。HIF-1α siRNA和VEGF165 siRNA转染至CNE-2,转染并共转染至HUVEC和C57BL/6J缺血性视网膜病变小鼠模型。转染24h后，RT-PCR检测发现细胞和视网膜中均有HIF-1α siRNA和VEGF165 siRNA表达质粒的表达，视网膜铺片亦见GFP的表达。两种siRNA在体外和体内均能下调HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白的表达水平。与对照组相比，基因治疗组的新生血管丛和新生血管内皮细胞核明显减少。共转染两种siRNA能最大程度的下调HUVEC和视网膜的VEGF表达及抑制视网膜新生血管的形成。以上结果说明，HIF-1α 和VEGF165 siRNA可能成为视网膜新生血管治疗的新手段。