中文摘要：

多药耐药（MDR）是白血病复发率高预后不良的主要原因，其形成过程受多种因素影响；本课题拟分析PI3K/Akt通路对白血病MDR的调控作用，同时就具有逆转MDR作用的中药活性成分对该通路影响结果说明其调控意义，进而对PI3K/Akt信号通路与逆转白血病MDR作用的相关性进行阐述分析。为此研究目的拟从PI3K/Akt信号通路的多个相关上下游因子（CDK2、P210、P27等）和Akt 、MRP1表达作为观察对象，追溯PI3K/Akt通路与MDR各环节间关系；同时结合中药活性成分对PI3K/Akt通路各环节产生的生物效应，进而说明PI3K/Akt信号通路在逆转白血病MDR的调控作用机制。 本课题研究将深入分析PI3K/Akt信号转导通路对白血病MDR的调控作用及中药活性成分干预结果，研究结论必将为寻找逆转白血病MDR的有效靶点及阐述作用机制提供生物学基础和科学依据。

结论摘要：

本课题分析PI3K/Akt通路对白血病MDR的调控作用，就具有逆转MDR作用的中药活性成分对该通路影响结果说明其调控意义。就上述研究目的，选择磷脂酰肌醇3-激酶特异性抑制剂LY294002，将白血病敏感株K562/S和白血病阿霉素耐药株K562/ADM细胞分别给予LY294002和ADM干预，评价LY294002作用前后阿霉素对白血病细胞的抑制作用，检测K562/S和K562/ADM各组细胞PI3K和Akt表达水平。结果显示LY294002干预前后不同浓度阿霉素对白血病K562/S和K562/ADM细胞抑制作用具有非常显著性差异（P<0.05）；不同浓度LY294002可降低K562/S和K562/ADM细胞中PI3K和Akt表达，LY294002各浓度组与ADM组及对照组组间比较具有非常显著性差异（P<0.05）。由此提示，磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路异常与白血病阿霉素耐药有关。同时，本课题研究内容以PI3K/Akt信号通路的相关因子P210、P27作为观察对象，追溯PI3K/Akt通路与MDR各环节间关系；结合中药活性成分对PI3K/Akt通路各环节产生的生物效应，说明PI3K/Akt信号通路在逆转白血病MDR的调控作用机制；本课题选用补骨脂素、苦参碱、槲皮素、姜黄素、川芎嗪、大黄酸六种中药单体成分作为研究对象，采用MTT比色法测定六种中药成分对K562/ADM细胞的增殖抑制作用，高效液相色谱法检测细胞内ADM的药物浓度，流式细胞术检测K562/ADM耐药细胞中P27和P170蛋白表达；结果显示上述六种中药活性成分逆转倍数在6.99-10.59之间，K562/ADM细胞中ADM积累倍数为11.6±3.7-17.7±2.8；对照组P27和P210蛋白表达率分别为33.1±2.1和6.51±1.33，K562/S和K562/ADMK562/S和K562/ADM细胞P27和P210相关蛋白表达率分别在54.2±3.5-72.1±4.2和6.21±1.35- 6.59±1.48之间；由此说明六种中药活性成分具有不同程度的逆转耐药细胞作用，且影响耐药细胞内化疗药物浓度；各中药活性成分具有不同程度抑制K562/ADM中P27蛋白表达作用，其逆转耐药作用通过影响PI3K/Akt信号转导途径是其可能机制之一。