中文摘要：

EZH2在乳腺癌、肝癌等肿瘤组织中被发现高表达，并与肿瘤干细胞的分化扩张相关。根据生物信息学分析和我们前期的研究结果，我们发现EZH2存在GSK-3β作用靶点的共有磷酸化基序并且能够被GSK-3β结合，故本研究假设EZH2在乳腺癌成瘤和干细胞增殖中作用能够被GSK-3β磷酸化信号通路调控。为此本研究拟检测EZH2和GSK-3β在乳腺癌组织和肿瘤细胞株中的表达相关性。然后，用激酶分析和质谱分析确定GSK-3β对EZH2的磷酸化位点，用基因突变、RNA干扰等手段评估GSK-3β对EZH2的磷酸化作用及β-TrCP对EZH2的泛素化降解作用，同时观察GSK-3磷酸化EZH2对β-TrCP泛素化EZH2的影响, 最后 通过功能分析证实GSK-3β/ β-TrCP调控EZH2对乳腺癌成瘤性及肿瘤干细胞的影响，本研究有望阐明乳腺癌发生的关键因子EZH2及其可能的调控机制。

结论摘要：

EZH2在乳腺癌、肝癌等肿瘤组织中被发现高表达，并与肿瘤干细胞的分化扩张相关。根据生物信息学分析和我们前期的研究结果，我们发现EZH2存在GSK-3β作用靶点的共有磷酸化基序并且能够被GSK-3β结合，故本项目推测EZH2在乳腺癌成瘤和干细胞增殖中作用能够被GSK-3β磷酸化信号通路调控。通过研究我们证实了GSK-3β对EZH2表达存在下调作用且该过程与GSK-3β的激酶活性直接相关。我们进一步发现GSK-3β活性能够影响β-TrCP与EZH2的结合并进而影响EZH2的泛素化降解。通过功能分析实验我们证实了GSK-3β通过调节EZH2影响乳腺癌肿瘤干细胞。最后，我们在临床乳腺肿瘤组织及乳腺癌细胞系中证实GSK-3β与EZH2表达的相关性。本项目阐明了乳腺癌发生的关键因子EZH2可能的调控机制，为确定乳腺癌发病的分子生物学机制并寻找相关的干预靶点提供重要的理论依据。