成牙本质细胞在牙齿发育和损伤修复过程中负责牙本质的形成和矿化。然而,成牙本质细胞分化和牙本质形成的研究受到细胞培养有限传代的限制,其机理尚未完全明确。本课题的目的是建立永生化人成牙本质细胞系,以提供大量的、稳定的、克隆化的、具有成牙本质细胞生物学表型和功能的细胞。我们采用脂质体转染法,将人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因导入原代培养的人成牙本质细胞样细胞。培养液加G418筛选约一个月,抗性细胞克隆形成,滤纸片法转移、扩增并长期连续培养。hTERT稳定转染入目的细胞,共获得5个细胞克隆,克隆5b来源的细胞在体外长期连续培养下生长良好,已传56代,约6个月,命名为hTERT-hOd-l(hTERT-immortalized human odontoblast-like cell line)。该细胞系仍为正常细胞而无明显转化特征,保持了人成牙本质细胞样细胞的生物学特征,在体外具有矿化能力。本研究建立起永生化人成牙本质细胞样细胞系,为成牙本质细胞和牙本质的研究提供良
英文主题词odontoblast; immortalization; cell line; hTERT; dentin