SD乳大鼠的心肌细胞的分离,培养和鉴定。通过缺氧再灌注诱导心肌细胞衰老模型,并在不同的时间点采用流式细胞仪检测细胞周期,X-gal检测β-半乳糖苷酶活性,提取细胞总mRNA和总蛋白,RT-PCR法和WESTERN-BLOTTING 法测定p16INK4a,p21WAF1,p53表达的变化,以证明模型的建立。建立p21WAF1的增强表达载体和沉默载体,转染H9c2心肌细胞,通过缺氧再灌注诱导细胞衰老模型。在不同时间点检测上述相同指标,探讨该基因在缺氧再灌注诱导的心肌细胞衰老模型中的作用机制。
英文主题词cardiomyocytes;hypoxia reoxygenation;H9c2 cell;p21WAF1;senescence