针刺委中穴在治疗腰背痛方面有独特的疗效。这一点在临床中已经得到认可,腰背痛往往和骨骼肌源性损伤相关。以往对委中治疗腰背痛的机理研究主要集中在追踪委中穴神经来源、镇痛,微循环改变等方面。针刺能否对骨骼肌损伤修复有促进作用,针刺委中能否干预腰部骨骼肌损伤损伤修复过程中炎性因子与肌卫星细胞的改变等,未见研究文献报道。本课题在我们前期研究工作的基础上,利用家兔腰部肌肉损伤模型,采用形态学方法、酶联免疫测定技术、细胞增殖检测、免疫组化和荧光免疫组化技术、分子生物学方法等,以骨骼肌卫星细胞激活增殖、bFGF和VEGF的基因和蛋白表达变化为切入点,结合肌纤维形态以及部分炎性因子、Ca2+的变化和内在联系,研究电针委中穴对骨骼肌损伤早期致炎因子的干预、中期骨骼肌卫星细胞激活增殖的影响、后期血管新生的调节机制,从促进创伤修复和组织再生的角度揭示"腰背委中求"的科学内涵。
Electro-acupuncture;Weizhong(BL40);lumbar muscle injury;Inflammatory response;muscle satellite cell(MSC)
四总穴歌中的“腰背委中求” 意寓委中穴在治疗腰背痛方面有独特的疗效,而且在临床中已得到认可,但国内外以往研究集中在委中穴的远端特异性作用及微循环改变等方面,且存在针刺后局部组织的具体改变不清楚,作用机理及途径不明确等问题。因此,本项目从损伤修复的角度出发,以家兔腰部肌肉损伤模型为研究对象,针刺委中穴,采用免疫组化和分子生物学等技术,观察针刺对腰肌损伤家兔炎症反应中致炎因子的调节与骨骼肌卫星细胞增殖分化的诱导,阐明委中穴在骨骼肌卫星细胞增殖与分化过程中的调节作用,从促进创伤修复和组织再生的角度,为进一步说明“腰背委中求”的机制提供实验依据。虽然本课题周期只有1年,但我们在研究内容上较原计划有所增加,观察腰部骨骼肌CD34+以评估血管新生情况,并从分子生物学的角度观察细胞外调节蛋白激酶ERK与骨骼肌结蛋白Desmin的蛋白表达。在规定时间内完成课题内容,并加以拓展。 研究结果如下(1)电针委中穴能降低血清CK、IL-8的含量,且血清LTB4的含量恢复到正常水平,说明电针委中穴可以明显抑制腰部肌肉损伤后的炎症反应。(2)电针委中组损伤局部肌肉HE染色显示肌纤维排列较模型组整齐,肌细胞体积较空白组有所增大,伴有轻度的结缔组织增生,但增生程度较模型组明显减轻。说明电针委中可促进损伤组织的修复。(3)电针委中穴能降低骨骼肌细胞浆与线粒体中Ca2+浓度,使其趋于正常水平。提示电针委中穴组局部肌肉组织不处于缺氧缺血状态(4)模型组血清及局部肌肉中VEGF的表达、新生微血管密度均明显大于电针委中组,说明电针委中穴能缩短微血管新生、成熟的时间,促进损伤部位微血管向毛细血管的快速成熟和成形。(5)电针委中穴发现该组PCNA阳性表达较模型组多,阳性细胞核位于肌细胞边缘,排列紧凑。此外,电针委中穴还可以促进骨骼肌Desmin的表达。这就说明电针委中穴能促进骨骼肌的损伤修复与成肌分化,这可能与促进骨骼肌与脊髓中bFGF含量的表达有关。(6)模型组ERK表达上升,说明损伤后ERK通路被激活,参与组织修复。电针委中穴可以促进ERK的蛋白表达量,提示电针委中穴对骨骼肌损伤修复及血管新生的影响可能与上调ERK的表达有关。 由上可知,电针委中穴可抑制腰部肌肉损伤后的炎症反应,促进肌卫星细胞增殖与分化,缩短微血管新生、成熟的时间,加速创伤修复及组织再生,这可能与ERK通路的激活有关。