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青蒿植物内生链霉菌中的质粒pCQ4与噬菌体ΦCQ4
  • ISSN号:0001-6209
  • 期刊名称:微生物学报
  • 时间:2012
  • 页码:825-831
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室,上海200032
  • 相关基金:国家“973项目”(2011CBA00801);国家自然科学基金(31121001);中国科学院知识创新工程项目(KSCX2-EW-G-13)
  • 相关项目:微生物代谢生理的系统与合成生物学研究
中文摘要:

【目的】在青蒿植物的内生链霉菌W75中检测到一个大的环型质粒pCQ4。克隆、测序、分析和功能研究pCQ4。【方法】Southern杂交确定质粒的酶切图谱,利用接合转移和同源重组方法将质粒克隆到了大肠杆菌BAC衍生的载体上,并进行鸟枪测序和分析。【结果】获得了全长为84833 bp的pCQ4序列,预测编码129个基因,其中成簇的40个基因与其它噬菌体的基因同源。实验证明含有质粒pCQ4的菌株能够低频率释放噬菌体ФCQ4,并可以侵染消除了pCQ4的W75X孢子和形成噬菌斑。在透射电镜下观察到噬菌体颗粒,脉冲场凝胶电泳显示ФCQ4为线型DNA。pCQ4与已发表的链霉菌质粒-噬菌体pZL12比对,编码噬菌体的主要结构蛋白的基因是相似的。【结论】链霉菌大的质粒pCQ4也可以转化为噬菌体ФCQ4,其噬菌体相关的基因簇可能是可转移的单元。

英文摘要:

[ Objective] Large plasmid pCQ4 was detected in Streptomyces sp. W75 from Artemisia annua L. We clonined, sequenced, analyzed and characterized pCQ4. [ Methods] Southern hybridization was used to determine restriction map of pCQ4. To clone the full-length of pCQ4, conjugation and recombinational cloning in a BAC vector were used. [Results] The complete nucleotide sequence of pCQ4 consisted of 84833-bp, encoding 129 ORFs which 40 ORFs resembled these of bacterial phages. W75 culture could infect W75 cured of pCQ4 and formed plaques on plate. Phage particle (~CQ4) was observed by transmission electron microscopy. Linearq)CQ4 DNA was detected on pulsed-field gel electrophoresis. Comparison to Streptomyces plasmid-phage pZL12, genes encoding major phage structural proteins resembled that of pCQ4. [ Conclusion] Streptomyces plasmid pCQ4 could be transformed into lytic phageФCQ4, and the phage segment on pCQ4 might be a mobile unit.

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期刊信息
  • 《微生物学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国微生物学会 中国科学院微生物研究所
  • 主编:谭华荣
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路3号中国科学院微生物研究所B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:actamicro@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807516
  • 国际标准刊号:ISSN:0001-6209
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1995/Q
  • 邮发代号:2-504
  • 获奖情况:
  • 国家优秀期刊二等奖,中科院优秀期刊二等奖,中国科协首届优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21879