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基于16S rDNA序列和RFLP分析的病鳗分离菌株鉴定
  • ISSN号:1007-7405
  • 期刊名称:集美大学学报(自然科学版)
  • 时间:2012
  • 页码:81-88
  • 分类:S942.5[农业科学—水产养殖;农业科学—水产科学]
  • 作者机构:[1]集美大学水产学院,福建厦门361021, [2]鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,福建厦门361021
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(31001136)
  • 相关项目:采用反向疫苗学技术研制欧洲鳗鲡病原菌外膜蛋白基因工程二联疫苗
中文摘要:

根据鳗鲡病原性嗜水气单胞菌Ⅱ型孔蛋白(porinⅡ)和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白S(ompS2)的基因全长序列,分别选取这两个全长序列中表达其蛋白质膜外部分且理论免疫原性较好的两个基因片段,通过融合PCR技术连接这两个外膜蛋白基因片段.根据表达载体(pGEX-2T-His)的限制性酶切位点在连接序列片段的两端引入限制性酶切位点BamHⅠ和EcoRⅠ,成功构建了双外膜蛋白基因片段重组表达载体(pGEX-2T-His-porinⅡ-ompS2).表达载体理论表达产物的蛋白质结构预测表明表达产物无信号肽和跨膜区,不存在三级结构;亲水性和免疫原性预测分析表明该表达蛋白理论上为可溶性蛋白并具有丰富的抗原决定簇,本研究为该表达载体的蛋白表达、纯化以及表达产物的免疫原性研究奠定了基础.

英文摘要:

A fusion DNA that composed of fragments of two genes that,encoding outer region of the outer termembrane proteins which have good immunogenicity of Aeromonas hydrophila( porin Ⅱ) and Edwardsiella tarda( ompS2),were obtained by the"two-steps"fusion PCR. Cut sites of BamHⅠ and EcoRⅠ were added at two 5'end of two primers amplifying the fusion DNA respectively,The recombinant expression vector( pGEX-2T-His-porin Ⅱ-ompS2) expressing fused protein was constructed. Protein structure prediction showed that the fused protein( bivalent outer membrane protein) had no signal peptide,transmembrane region or three stage structure. Hydrophilic and immunogenicity analysis showed that the expressed fused protein is a soluble protein that is made up of many antigenic determinants. This study laid a foundation for the expression,purification and immunogenicity study of the protein expressed by the recombinant expression vector.

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期刊信息
  • 《集美大学学报:自然科学版》
  • 主管单位:集美大学
  • 主办单位:集美大学
  • 主编:曹敏杰
  • 地址:福建厦门集美区银江路185号
  • 邮编:361021
  • 邮箱:xuebao@jmu.edu.cn
  • 电话:0592-6181045
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7405
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1186/N
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  • 获奖情况:
  • 华东地区优秀期刊" "中国高校特色科技期刊" "福...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,英国食品科技文摘
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