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猪维甲酸诱导基因Ⅰ的克隆及其在诱导Ⅰ型干扰素中的作用
  • ISSN号:0366-6964
  • 期刊名称:畜牧兽医学报
  • 时间:0
  • 页码:135-140
  • 语言:中文
  • 分类:S828[农业科学—畜牧学;农业科学—畜牧兽医] S813.1[农业科学—畜牧学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]华中农业大学动物医学院动物病毒室,武汉430070, [2]华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉430070
  • 相关基金:教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0347); 国家自然科学基金(30871871)
  • 相关项目:猪繁殖与呼吸综合征病毒感染激活IL-10的分子机制研究
中文摘要:

本研究旨在探讨猪维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)的结构特征及其在I型干扰素信号通路中的作用。从猪外周血单核细胞中克隆猪RIG-Ⅰ全长cDNA,进一步构建猪RIG-Ⅰ全长及不同区域缺失突变体的真核表达载体,通过IFN-βⅠ、RF3和NF-κB的荧光素酶报告系统分析猪RIG-Ⅰ在诱导I型干扰素中的作用。结果表明,猪RIG-Ⅰ开放读码框全长为2 832 bp,编码943个氨基酸,与鸭嘴兽、大鼠、小鼠、猴、黑猩猩、人、马和牛RIG-Ⅰ相应序列的同源性为53.2%~83.2%。猪RIG-Ⅰ超表达能显著激活转录因子IRF3和NF-κB,并诱导IFN-β的产生。缺失猪RIG-Ⅰ的CARD区不仅不能激活下游信号,而且还负调控poly(Ⅰ:C)诱导IFN-β的能力。结果提示RIG-Ⅰ是猪天然免疫系统中的一个模式识别受体,在I型干扰素诱导的信号通路中具有重要作用。

英文摘要:

This experiment was conducted to study the structural characterization of porcine RIG-Ⅰ(poRIG-Ⅰ) and its role in type Ⅰ interferon signal pathway.The full length cDNA of poRIG-Ⅰ was amplified from porcine peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) by RT-PCR.The eukaryotic expression vector of poRIG-Ⅰ full-length and the mutated poRIG-Ⅰ were constructed,respectively.The role of poRIG-Ⅰ in the induction of type Ⅰ interferon was investigated by using IFN-β,IRF3 and NF-κB luciferase reporter system.The results showed that the open reading frame of poRIG-Ⅰ is 2 832 bp encoding 943 amino acids.The putative poRIG-Ⅰ protein exhibited identity with the corresponding sequences of platypus,rat,mouse,monkey,chimpanzee,human,horse and cattle ranging from 53.2% to 83.2%.Overexpression of the full-length poRIG-Ⅰ significantly induced the expression of IFN-β by activating transcription factors NF-κB and IRF3.The mutant CARD lacking poRIG-Ⅰ was not capable of activating downstream signals and inhibited poly(I:C)-mediated IFN-β production.These results indicate that poRIG-Ⅰ is a pattern recognition receptor in innate immune system of pig and plays an important role in the induction of type Ⅰ interferon.

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期刊信息
  • 《畜牧兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国畜牧兽医学会
  • 主编:文杰
  • 地址:北京海淀区圆明园西路2号中国农科院畜牧所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:xmsyxb@263.net
  • 电话:010-62815987 62816996
  • 国际标准刊号:ISSN:0366-6964
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1985/S
  • 邮发代号:82-453
  • 获奖情况:
  • 1992年北京优秀期刊奖,1998年、2000年在全国畜牧兽医优秀期刊评比中获一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),瑞典开放获取期刊指南,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21857