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大鼠远端肺动脉平滑肌细胞分离与原代培养
  • ISSN号:1674-1927
  • 期刊名称:中华生物医学工程杂志
  • 时间:0
  • 页码:176-179
  • 语言:中文
  • 分类:R285.5[医药卫生—中药学;医药卫生—中医学]
  • 作者机构:[1]广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所,510182
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金面上资助项目(30770953);教育部高等学校博士学科点立项科研基金(20104423110001)
  • 相关项目:钙离子信号转导在低氧性肺动脉高压形成中的作用研究
作者: 王健|
中文摘要:

目的 观察尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)后细胞内基础钙离子浓度的改变及平滑肌细胞膜瞬时受体电位通道(TRPC1,TPRC6)mRNA表达水平变化.方法 不同浓度尼古丁[O(对照组)、10、20、50、100μg/L]刺激大鼠气道平滑肌细胞,作用24及48 h后,采用Incyte细胞内钙浓度检测系统观察细胞内钙离子浓度的变化.提取细胞总RNA,反转录成cDNA,实时定量PCR方法检测细胞TRPC1和TRPC6 mRNA表达量变化.结果 20、50、100μg/L的尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细24和48 h后,细胞内基础钙离子浓度均较对照组明显升高[(117.99±19.39)、(122.89±17.91)、(124.70±17.93)nmol/L比(85.85±12.60)nmol/L;(142.07±18.99)、(162.27±19.91)、(207.30±26.56)nmol/L比(98.04±2.39)nmol/L,均P<0.05].而细胞中TRPC1和TPRC6 mRNA相对浓度也均较对照组显著升高(P<0.05),其中,100μg/L尼古丁刺激气道平滑肌细胞48 h后,细胞内基础钙离子浓度和TRPC6 mRNA相对表达量均较刺激24 h后的明显升高(P<0.05).结论 尼古丁可能通过上调大鼠气道平滑肌细胞膜瞬时受体电位通道TRPC1和TPRC6的表达而导致大鼠气道平滑肌细胞内基础钙离子浓度增加.

英文摘要:

Objective To study the changes of intracellular Ca2+ concentration and transient receptor potential channels 1 and 6(TRPC1,TPRC6)mRNA expression in rat airway smooth muscle cells (ASMC) after nicotine intervention.Methods Various concentrations of nicotine(10 μg/L,20 μg,L,50μg/L,100μg/L)were used to stimulate rat airway smooth muscle cells.The intracellular Ca2+ concentrations after nicotine intervention for 24 and 48 hours were measured by Incyte system.The total RNA was extracted from rat ASMC.and reversely transcribed into cDNA.The real-time PCR method was used to analyze the changes in TRPC1 and TRPC6 mRNA expression.Results The groups treated with different concentrations of nicotine(20 μg/L,50μg/L,100 μg/L)for 24 or 48 hours showed increases in intracellular Ca2+concentration when compared with control[(117.99±19.39),(122.89±17.91),(124.70±17.93)nmol/L vs (85.85±12.60)nmol/L;(142.07±18.99),(162.27±19.91),(207.30±26.56)nmol/L vs(98.04±2.39)nmol/L;P〈0.05].In addition,relative expressions of TRPC1 and TPRC6 mRNA in rat ASMC also increased significantly compared with controls(P〈0.05).The levels of intracellular Ca2+ concentration and TRPC6mRNA were significantly higher with 48 h nicotine(100 μg/L,L)intervention than as found with 24 h nicotineintervention.Conclusion Nicotine may increase the intracellular Ca2+ concentration by up-regulating the expression of TRPC1 and TPRC6 in rat ASMC.

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期刊信息
  • 《中华生物医学工程杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:广州医学院
  • 主办单位:中华医学会 广州医学院
  • 主编:
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  • 邮编:510182
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  • 国际标准刊号:ISSN:1674-1927
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5668/R
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  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
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