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人工核酶M1GS结构与功能相互关系的研究
  • ISSN号:1000-4718
  • 期刊名称:《中国病理生理杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R363[医药卫生—病理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]暨南大学生命科学技术学院,广东广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金项目资助(No.30370776);广东省自然科学基金重大项目资助(No.36703);广东省自然科学基金项目资助(No.021162;No.000718)
中文摘要:

目的:研究核酶M1GS其二级结构与体外切割活性之间的关系。方法:以人巨细胞病毒(HCMV)DNA聚合酶基因U154为靶基因,构建了人工核酶M1GS-T7。通过软件RNA structure对M1GS在3个具有相对稳定结构的温度(20℃、37℃、55℃)的空间构象进行模拟,然后通过体外切割实验来检测不同温度下核酶M1GS体外切割活性的变化。为一步研究核酶M1GS二级结构与体外切割活性之间的关系,参照温度变化实验结果及RNA二级结构的模拟结果,引入突变位点,构建了在37℃与55℃时M1GS-T7具有相同二级结构的突变型核酶mM1GS-T7,并通过体外切割实验对两者的活性进行比较。结果 :在温度变化实验中,55℃核酶的体外切割活性最高。而在突变实验中,37oCmM1GS-T7比M1GS-T7的活性略高。结论:具有某种特定二级结构的M1GS-T7有相对较高的体外切割活性,核酶的结构与其功能之间存在一定的对应关系。

英文摘要:

AIM: To study the interrelation between the structure and the function of artificial ribozyme M1GS. METHODS: Ribozyme Mi GS - T7, which targeted the mRNA segment of HCMV UL54 gene, was constructed. The secondary structure of MIGS was simulated under different temperatures (20 ℃, 37 ℃ or 55℃, at which the secondary structure of MIGS was relatively stable) and the interrelation between the secondary structure and the cleavage activity of MIGS was analyzed under different temperature /n vitro. To investigate the interrelation between the structure and the function of ribozyme Mi GS further, mMi GS - T7 was designed, in which some mutation sites was added, according to the result of temperature change experiment and the simulated secondary structure, showing that were the same structures at 37℃ as that of MIGS- T7 at 55℃. RESULTS: In temperature change experiment, the cleavage activity of MIGS- T7 was highest at 55℃. The result of mutant experiment showed that the mutant type was more active than M1GS - T7 at 37℃. CONCLUSION: The cleavage activity of MIGS, which has some certain secondary structure, is higher than others. There is some interrelation between the structure and the function of MIGS.

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期刊信息
  • 《中国病理生理杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国病理生理学会
  • 主编:陆大祥
  • 地址:广东省广州市黄埔大道西601号
  • 邮编:510632
  • 邮箱:obsbjbb@jnu.edu.cn
  • 电话:020-85220269
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4718
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1187/R
  • 邮发代号:46-98
  • 获奖情况:
  • 1997-2000年连续获得中国科协优秀基础性和高科技...,1992、1996、2000、2004、2008年,连续五次入选中...,2008-2010年,连续三年荣获“百种中国杰出学术期...,2010年获广东省期刊最高奖——品牌期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:37010