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Mov10稳定表达肝癌细胞株的建立及其生物学研究
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:《第三军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R73-351[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学] R730.2[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学:附属第二医院感染科,重庆加400010, [2]泸州医学院附属医院感染科,四川泸州646000, [3]病毒性肝炎研究所,重庆400010
  • 相关基金:国家自然科学基金重点项目(30930082);国家自然科学基金青年科学基金(81300258)
中文摘要:

目的构建稳定表达Movl0蛋白的HepG2细胞株,探讨Movl0在肝癌细胞增殖和侵袭等生物学行为中的作用。方法将含Movl0基因的真核表达载体pCMV.Movl0-GFP质粒,采用脂质体介导法转染至人肝癌细胞系HepG2,经过C,418抗性筛选阳性克隆。采用qPCR、Western blot技术检测Movl0的表达,免疫荧光技术观察稳定株Movl0的细胞分布。通过MTS、平板克隆形成试验、体外侵袭能力检测观察稳定细胞株的增殖情况、克隆形成能力和侵袭能力。结果成功构建了表达Movl0蛋白的稳定细胞株HepG2.Movl0。内源性及外源性Movl0蛋白主要分布于细胞质。稳定细胞株HepG2.Movl0较对照组细胞增殖速度快(P〈O.05),体外侵袭能力强(P〈0.05)。稳定细胞株HepG2-Movl0、HepG2-GFP和细胞株HepG2的克隆形成能力分别为(56.7±17.3)%、(38.3±12.1)%、(31.3±8.1)%,HepG2-Movl0细胞与后两者间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论成功构建稳定表达Movl0的细胞株HepG2-Movl0,发现Movl0能促进肝癌细胞增殖并提高克隆形成能力和侵袭能力。

英文摘要:

Objective To establish a cell line stably expressing Moloney leukemia virus 10 (Movl0) protein in HepG2 cells and investigate the role of Movl0 in the cell proliferation and invasion. Methods The eukaryotic expression plasmid pCMV-Movl0-GFP was transfeeted into the HepG2 cells mediated by lipo- fectamine and then selected with G418. The mRNA and protein expression of Movl0 was detected by qPCR and Western blotting, respectively. Immunofluorescence assay was used to analyze the location of Movl0. The proliferation and colony-formation ability was measured by MTS assay and plate colony-formation assay. Cell invasion assay was performed in vitro. Results Our established HepG2-Movl0 Cells stably expressed Movl0 protein. Endogenous and exogenous Movl0 protein was mostly distributed in the cytoplasm. HepG2-Movl0 ceils had significantly higher proliferative rate and stronger ability of invasion than HepG2 cells (P 〈 0. 05 ). Colony forming efficiency was (56.7 ± 17.3 ) %, (38.3 ± 12.1 ) %, (31.3 ± 8.1 ) % respectively in HepG2-Movl0, HepG2-GFP and HepG2 cells, with the fromer significantly higher than the other 2 cell lines (P 〈 0. 05 ). Conclusion A hepatoma stable cell line over-expressing Movl0 is successfully established. Stable overexpres-sion of Movl0 protein obviously promotes cell proliferation, colony formation and invasion.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
  • 地址:重庆市沙坪坝区高滩岩30号第三军医大学学报编辑部
  • 邮编:400038
  • 邮箱:aammt@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023- 68752187
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1126/R
  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:47530