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4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化
  • ISSN号:0438-0479
  • 期刊名称:厦门大学学报(自然科学版)
  • 时间:2011
  • 页码:123-126
  • 分类:R392.1[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]厦门大学海洋与环境学院,福建厦门361005
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(41076081)
  • 相关项目:拟穴青蟹促性腺激素释放激素(GnRH)的结构与功能研究
中文摘要:

用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔获得GnRH抗体.用间接ELISA方法检测抗血清效价,并用Western blot鉴定其特异性.制备抗原肽亲和纯化柱,纯化多克隆抗体.结果显示,4种多克隆抗体效价高达1∶500 000(体积比),并能和相应的GnRH多肽特异性结合,纯化后的抗体在SDS-PAGE显示为单一条带.通过上述方法,获得4种高效价、高纯度的GnRH抗体,为低等动物GnRH的研究提供了理论依据.

英文摘要:

Four immunogens was prepared by conjugation of four synthetic GnRH peptides(octopus GnRH,tunicate GnRH-Ⅰ,lamprey GnRH-Ⅰand lamprey GnRH-Ⅲ) and carrier protein key-hole limpet hemocyanin(KLH) respectively by MBS method.Antibody production against each immunogen was initiated in vivo by emulsifying them in Freund′s adjuvant and administering them to 2-month-old male New Zealand rabbits by hypodermal injection.The titer of antiserums was tested by indirect ELISA,and the results showed that the titer of four antibodies was 1∶500 000.The results of Western blot analysis showed that each antibody could specifically bind to the corresponding GnRH peptide.Finally,antiserums were purified by affinity purification,and the purified antibody showed a single band in SDS-PAGE.These datas suggest that four GnRH antibody with high effect and high purity were produced,and they provide an useful tool for studying GnRH of lower animal.

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期刊信息
  • 《厦门大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
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  • 主办单位:厦门大学
  • 主编:谢素原
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  • 国际标准刊号:ISSN:0438-0479
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1070/N
  • 邮发代号:34-8
  • 获奖情况:
  • 多次被评为全国、华东地区、福建省的优秀科技期刊,2001年入选国家新闻出版总署评定的"中国期刊方阵",2003年获国家新闻出版总署颁发的"第二届国家科技...,2006年获国家教育部科技司颁发的"首届中国高校精...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
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