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改良2,4-二硝基苯肼法测定脑内源甲醛
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q42[生物学—神经生物学;生物学—生理学] O65[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]中国科学院生物物理研究所,脑与认知科学国家重点实验室,北京100101, [2]中国科学院研究生院,北京100049
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划资助项目(2010CB912303); 国家重点基础研究发展计划(973)(2012CB911004); 中国科学院创新方向项目(CAS-KSCX2-YW-R-119)及创新预研项目(KSCX2-YW-R-256); 国家自然科学基金面上项目(30970695); 强生集团科技公司基金(GJHZ1131)资助项目
中文摘要:

内源甲醛代谢失衡所造成的脑慢性损伤被认为是衰老过程中记忆丢失的危险因素之一,因此,有必要准确测定脑内不同区域甲醛的含量为相关研究提供参考.作者通过2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)偶联高效液相色谱(UV-HPLC),测定了家猪脑额叶、顶叶、颞叶、枕叶、海马、小脑、脑干内源甲醛含量(75.5~83.4μmol/kg).采用10%三氯乙酸处理脑组织匀浆(pH=1.0),不但可以避免蛋白质及其他分子的干扰,还可以省略现有方法中的萃取步骤,且提高了测试的灵敏度(P〈0.05).该方法的回收率约95.96%~102.04%,相对标准偏差(n=5)小于10%.结果表明,改良2,4-DNPH法用于脑内源甲醛的测定,其操作简便、可信度高.

英文摘要:

Chronic impairments of brain caused by accumulation of endogenous formaldehyde as ageing is thought as one of the risk factors for sporadic age-related dementia.Thus,it is necessary to determine the endogenous concentration of formaldehyde in brain.Using 2,4-dinitrophenylhydrazine(2,4-DNPH) in the assay, the concentrations of formaldehyde in parietal lobe,frontal lobe,temporal lobe,occipital lobe,hippocampus, cerebellum and brainstem of porcine brain(n=5) were measured through UV-HPLC.Homogenizing brain tissues with 10% trichloroacetic acid(pH =1.0) not only avoided the disturbance from contaminated protein and other compounds,but also eliminated the step extraction of FA-DNPH derivative(2,4-dinitrophenylhydrazone) and improve the methodological sensitivity(P〈 0.05).The porcine brain formaldehyde was 75.5~83.4 μmol/kg fresh brain tissues measured by this improved method.Recoveries of spiked formaldehyde at low and high level were 95.96%~102.04% with relative standard deviations less than 10%.This suggests that the modified 2,4-DNPH method is effective enough to measure the endogenous formaldehyde in brain tissues.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821