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枯草芽孢杆菌木聚糖酶的克隆表达及其酶解两种木聚糖的产物分析
  • ISSN号:1002-6630
  • 期刊名称:《食品科学》
  • 时间:0
  • 分类:Q819[生物学—生物工程]
  • 作者机构:西北农林科技大学林学院,陕西杨凌712100
  • 相关基金:国家自然科学基金面上项目(31170607)
中文摘要:

通过基因克隆方法获得枯草芽孢杆菌木聚糖酶Xyn A,考察经镍离子亲和柱纯化后的Xyn A分别在桦木木聚糖和毛榉木木聚糖中的酶解情况,利用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)及基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/MS)法鉴定木聚糖酶Xyn A的酶解产物。运用MALDI-TOF/MS分析枯草芽孢杆菌木聚糖酶Xyn A酶解桦木木聚糖和毛榉木木聚糖产物不同的聚合度寡糖的分布情况。结果表明:在桦木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖主要为木二糖(X2)和木三糖(X3),酸性木寡糖聚合度为412,并且每一个酸性木寡糖上仅连接着一个甲基葡萄糖醛酸侧链(Me G)。在毛榉木木聚糖酶解液中,产生的中性木寡糖与在桦木木聚糖酶解液中相同,酸性木寡糖的结构相似,聚合度为416。因此木聚糖酶Xyn A具有生产木二糖(X2)和木三糖(X3)以及酸性木寡糖(Me GXn)的功能。

英文摘要:

Matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF/MS) was applied to analyze molecular weight distribution of hydrolysis products from birchwood xylan and beechwood xylan digested by Bacillus subtilis xylanase(Xyn A), obtained through recombinant expression and purified by Ni+-IDA column chromatography. The hydrolysis products were identified by thin layer chromatography(TLC) and MALDI-TOF/MS. Results showed the enzymatic hydrolysis of birchwood xylan yielded mainly xylobiose(X2) and xylotriose(X3) as well as acidic xylooligosacchrides with a degree of polymerization(DP) of 4–12 each including a single methyl-glucuronic acid side chain. Both xylobiose and xylotriose were found in the hydrolysate of beechwood xylan as well as acidic xylooligosacchrides with a DP of 4–16 structurally similar to those from birchwood xylan. Therefore, the recombinant Xyn A has the potential to produce X2, X3 and acidic xylooligosacchrides.

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期刊信息
  • 《食品科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国商业联合会
  • 主办单位:北京市食品研究所
  • 主编:孙勇
  • 地址:北京西城区禄长街头条4号
  • 邮编:100050
  • 邮箱:foodsci@126.com
  • 电话:010-83155446-8006
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-6630
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2206/TS
  • 邮发代号:2-439
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,1986年原商业部重大成果三等奖,1997年国内贸易部优秀科技期刊三等奖,第三届中国出版政府奖提名奖,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:115579