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短双链RNA对CVB3病毒细胞内清除作用的可行性研究及其机制探讨
  • ISSN号:1003-9279
  • 期刊名称:中华实验和临床病毒学杂志
  • 时间:0
  • 页码:260-262
  • 语言:中文
  • 分类:R373.23[医药卫生—病原生物学;医药卫生—基础医学] R392[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]首都儿科研究所分子免疫室,北京100020
  • 相关基金:国家自然科学基金(30772025);北京市自然科学基金(5042005).
  • 相关项目:RNA干扰对小鼠病毒性心肌炎的病原及炎性损伤的可控性研究
中文摘要:

目的通过观察短双链RNA(Short interfering RNA,siRNA)体外转染HeLa细胞评价siRNA抗CVB3病毒感染的可行性和抑制作用机制。方法通过细胞病变作用保护实验,选择合适的siRNA剂量。Western Blot、RT.PCR等方法在体外检测siRNA抗CVB3病毒复制作用及作用途径。结果siRNA.3753通过脂质体转染试剂能高效转入HeLa细胞,转染效率可达98.77%,在细胞内可稳定长达48h。siRNA-3753的浓度为0.6gmol/L对病毒抑制率高同时对细胞不会产生毒性作用,该浓度作为本次研究的实验剂量。siRNA-3753抗CVB3病毒感染作用是通过siRNA直接降解病毒基因得到的,而不是通过激活PKR或干扰素等其他未知因素起效的。结论siRNA可以高效、较长时间的转染入HeLa细胞内,在低剂量时即产生较好的抗病毒感染作用,通过直接降解病毒基因组的途径特异性抑制CVB3病毒的复制及感染。

英文摘要:

Objective To evaluate the possibility of short interfering RNA (siRNA) inhibiting Coxsackievirus B3 (CVB3) infection in vitro, and discover the mechanism initially. Methods We obtained proper effective dosage of siRNA by observing cytopathic effect ( CPE ). Estimate its antiviral activities and its pathway of siRNA by Western Blot assay and RT-PCR. Results Results showed that siRNA-3753 can be effectively transfected into HeLa cells, we can achieve a high transfection efficiency up to 98.77 % and its effect can last for 48 h stably in cells. 0.6 μmol/L siRNA-3753 got a high inhibiting effect of virus and didn't show any toxicity to cells. So we consider this concentration as the experimental concentration, siRNA-3753 can debase virus reproduction. The antiviral effect is sequence-specific and is not attributable to either interferon or the interferon response effectors protein kinase R (PKR). Conclusion The data confirmed that siRNA can effectively inhibit CVB3 infection in vitro, its antivirus effect was gained from specific debase of virus genome.

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期刊信息
  • 《中华实验和临床病毒学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:北京市宣武区迎新街100号
  • 邮编:100052
  • 邮箱:
  • 电话:010-63530971
  • 国际标准刊号:ISSN:1003-9279
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2866/R
  • 邮发代号:18-224
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊二等奖,中华医学会优秀科技期刊二等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11623