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POMP与SuFu相互作用调控Hedgehog信号通路的活性
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:中国生物化学与分子生物学报
  • 时间:2012
  • 页码:522-530
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学] Q51[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]南昌大学第一附属医院医学科研中心,南昌330006
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)前期研究专项(No.2010CB535001),国家自然科学基金(No.81060095,No.31171359),中国博士后基金(No.20100481187),江西省自然科学基金(No.2009GZY0209)资助项目
  • 相关项目:HSP90分子伴侣复合物在神经肌肉接头形成中的作用及机制
中文摘要:

Hedgehog信号通路在胚胎发育、组织再生中发挥重要的作用,且与癌症发生发展密切相关.其胞内调控组分SuppressorofFused(SuFu)蛋白通过结合转录因子Gli(S),负调控该信号通路,但其作用的分子机制仍不甚清楚.在本项研究中,以人SuFu作为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术成功地筛选到1个新的相互作用因子一蛋白酶体成熟蛋白(POMP).通过免疫共沉淀、体外GSTpull-down和免疫细胞化学实验验证其相互作用.为了探究POMP与SuFu的相互作用对Hedgehog信号通路的影响,构建了POMP的过表达质粒和干扰质粒(miR.RNAi)以及转录因子Gli活性检测系统,即荧光素酶报告基因法,结果显示,过表达SuFu蛋白时POMP正调控Hedgehog信号通路,而下调POMP的表达则抑制Gli的活性.该研究结果揭示了POMP新的生物学功能,为阐明Hedgehog信号通路的具体分子机制提供了新的线索.

英文摘要:

Hedgehog signaling pathway plays an important role in embryogenesis and tissue regeneration, which is also related closely to carcinogenesis and tumor formation. Suppressor of Fused (SuFu) , the intracellular component of Hedgehog signaling, negatively regulates the pathway via binding to transcription factors Gli (s), but the specific molecular mechanism still remains unclear. Herein, proteasome maturation protein (POMP) human SuFu using yeast two hybrid was screened out successfully as a new interacting protein of system. Their interaction was further confirmed by co- immunoprecipitation and GST pull-down, and the co-localization was also observed under confocal microscope. To explore the influence of their interaction on Hedgehog signaling, POMP overexpression plasmid, POMP RNAi plasmids and Gli transcription activity detection system (dual luciferase reporter assay) were constructed. Co-transfected with SuFu, exogenous POMP can positively regulate Hedgehog signaling, while knockdown of POMP restrained Gli activity. Our studies will provide new clues for elucidating the specific molecular mechanisms of Hedgehog signaling and reveal a new biology function of POMP.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731