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油菜菌核病菌激发子基因SsXYN克隆及表达载体构建
  • ISSN号:1672-352X
  • 期刊名称:安徽农业大学学报
  • 时间:2013.7
  • 页码:631-635
  • 分类:S435.654[农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]安徽农业大学植物保护学院,合肥230036
  • 相关基金:国家自然科学青年基金项目(31101426); 公益性行业(农业)科研专项(201103016)共同资助
  • 相关项目:离子通道基因和MADS-box转录因子在激发子harpin诱发的气孔关闭中的作用机制研究
中文摘要:

以核盘菌菌株NGA4提取的总RNA为模版,利用RT-PCR技术扩增获得SsXYN基因的全长cDNA片段,将其克隆到pMD19-T载体上,菌落PCR、酶切鉴定和cDNA测序结果表明成功克隆了核盘菌SsXYN基因。从pMD19-T:SsXYN载体上,用BamH I和Sal I双酶切切下目的基因片段,将该基因片段连接到原核表达载体pET32a中。菌落PCR和酶切鉴定结果显示成功构建了表达载体pET32a:SsXYN。利用热击法将该重组表达载体导入大肠杆菌BL21,获得携带SsXYN基因的大肠杆菌菌株,为进一步研究激发子诱发植物抗病性机理奠定了基础。

英文摘要:

Total RNA was extracted from Sclerotinia sclerotiorum NGA4mycelia and used as the template to amplify the full length of cDNA of SsXYN gene by RT-PCR,and the gene fragment was subsequently cloned into pMD19-T vector.The results of bacterial colony PCR,enzyme analysis and sequencing analysis indicated that the S.sclerotiorum SsXYN gene was successfully cloned.SsXYN gene was digested completely from pMD19-T : SsXYN by BamH I and Sal I,and then was cloned into expression vector pET32a.The results of bacterial colony PCR and enzyme analysis showed the expression vector pET32a : SsXYN was successfully constructed.After that,the recombinant expression vector was carried into E.coli BL21 by heat-shock transformation,and the strain of E.coli BL21 carrying SsXYN gene was obtained.The study provides a basis for our understanding of the elicitor SsXYN downstream signaling pathway in plant immunity.

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期刊信息
  • 《安徽农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:安徽省教育厅
  • 主办单位:安徽农业大学
  • 主编:程备久
  • 地址:合肥市长江西路130号
  • 邮编:230036
  • 邮箱:ahnydxxb@mail.hf.ah.cn
  • 电话:0551-65786465
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-352X
  • 国内统一刊号:ISSN:34-1162/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 安徽省优秀科技期刊一等奖,全国优秀科技期刊三等奖,华东地区优秀期刊奖,全国优秀高校自然科学学报及教育部优秀科技期刊二等奖,安徽省优秀高校自然科学学报一等奖,全国高校优秀科技期刊一等奖,安徽省高等学校优秀学报一等奖,全国高校优秀科技期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13625