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毛白杨ISSR反应体系的建立及优化
  • ISSN号:1000-1522
  • 期刊名称:《北京林业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:S792.117[农业科学—林木遗传育种;农业科学—林学]
  • 作者机构:[1]北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室, [2]北京农学院生物技术系, [3]山东省冠县苗圃
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30571516).
中文摘要:

为应用ISSR技术开展毛白杨遗传变异分析、辅助育种、品种鉴定、系统进化等研究,以(GTG)6为引物,通过单因子实验分别研究了退火温度、引物浓度、dNTP浓度、Mg^2+浓度、TaqDNA聚合酶用量对毛白杨ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适宜于毛白杨ISSR分析的扩增体系:20μL PCR反应体系,1×Taq DNA酶缓冲液(10mmol/L IrisHCl,50mmol/LKCl,0.1%Trion X-100,pH9.0),1.5mmol/LMgCl2,1.0U Taq酶,10ng模板DNA,0.2μmol/L引物,0.2mmol/LdNTP,引物(GTG)6的最适退火温度为61℃.

英文摘要:

In order to use ISSR markers to study genetic variation, assistant breeding, cultivar identification and phylogenesis of Populus tomentosa, the annealing temperature, concentration of primer, dNTP, Mg^2+ and Taq DNA polymerase dosage on ISSR-PCR amplications were tested to determine their optimal levels and establish the following optimal reaction system for ISSR analysis in P. tomentosa. The results showed that the optimal conditions for ISSR-PCR of P. tomentosa were as follows: PCR reaction volume of 20 μL, 1 ×Taq buffer (10 mmol/L Tris-HCl, 50 mmol/L KCl, 0.1% Triton X-100, pH 9.0), 1.0 U Taq DNA Polymerase, 0.2 μmol/ L primer, 0.2 mmol/L dNTP, 1.5 mmol/L MgC12 and 10 ng template DNA. The optimized annealing temperature was 61℃ for primer (GTG)6.

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期刊信息
  • 《北京林业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:北京林业大学
  • 主编:尹伟伦
  • 地址:北京市海淀区清华东路35号
  • 邮编:100083
  • 邮箱:bldxeb@bjfu.edu.cn
  • 电话:010-62337673
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-1522
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1932/S
  • 邮发代号:82-304
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:30004