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TES基因C端的分段克隆与表达
  • ISSN号:1674-568X
  • 期刊名称:《基因组学与应用生物学》
  • 时间:0
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]湖南师范大学生命科学院,湖南长沙410081, [2]湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金项目(30470945);湖南省教育厅项目(06C816).
中文摘要:

为了在大肠杆菌中分段表达人类TES基因C端3个顺次排列的LIM结构域,利用PCR技术从含有TES基因全长编码序列的质粒pCMV-HA-TES中扩增出这3个LIM domain基因片段,分别重组入pGEM-T载体,再经酶切后,将获得的目的片段亚克隆入原核表达载体pQE-N1进行融合表达。酶切鉴定及测序结果表明,扩增产物与已知基因序列一致,成功构建了3个目的片段的pQE-N1表达质粒;SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导表达出与预期分子质量大小相同的3个融合蛋白。

英文摘要:

In order to express three tandem LIM domains in the C-terminus of TES individually in Escherichia coli BL 21, three gene fragments encoding corresponding LIM domains in TES C-terminus were amplified from pCMV-HA-TES plasmid containing the full length of TES coding sequence by PCR and cloned into pGEM-T vector respectively. The target gene fragments obtained by digesting the recombinant plasmids with restriction endonuclease were subcloned into prokaryotic expression vector pQE-N1 for fusion expression. The results of restriction endonuclease digestion and sequence analysis indicated that three recombinant plasmids for expression of corresponding LIM domains in TES C-terminus were successfully constructed. The fusion proteins with the molecular weights as prospected were separated by SDS-PAGE gel after induced expression.

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期刊信息
  • 《基因组学与应用生物学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:广西大学
  • 主办单位:广西大学
  • 主编:朱玉贤
  • 地址:广西南宁市大学东路100号广西大学西校园《基因组学与应用生物学》编辑部111室
  • 邮编:530004
  • 邮箱:gab@hibio.org 571388455@qq.com
  • 电话:0771-3239102
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-568X
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1369/Q
  • 邮发代号:48-213
  • 获奖情况:
  • 全国优秀高校学校自然科学学报,教育部优秀科技期刊,广西优秀科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:4299