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黑曲霉α-葡萄糖苷酶cDNA的克隆及表达
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学] Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530004
  • 相关基金:国家自然基金项目(20362001)
中文摘要:

研究黑曲霉(Aspergillus niger)M-1菌株的α-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆及表达。以M-1菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR扩增α-葡萄糖转苷酶的cDNA,重组到Trc启动子控制下的表达载体pSE380中,构建重组质粒psE-atg,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTC诱导表达。初步研究表明:重组蛋白具有葡萄糖苷酶活性,最适pH为6.0,最适温度为45℃,金属离子Cu^2+和Mn^2+对酶活力有明显的促进作用。添加1.6mmol/L IPTC重组菌的诱导作用最大,在培养中添加麦芽糖,对重组菌产酶有显著的促进作用。

英文摘要:

The paper reports the research about cloning and expression of an α - glucosidase cDNA from Aspergillus niger in E. coli. cDNA was amplified by RT-PCR from total RNA of Aspergillus niger, and cloned into expression vector pSE380 which is controlled by Tre promoter, resultant pSE-atg was transformed to E. coli BL21(DE3 ) .The positive transformants were fermented in flasks and induced by IPTC. The recombinant α-transglucosidase activity amounted to 485.40U/g, and showed the optimal activity at pH 6.0 and 45℃. The research also found that the recombinant enzyme was obviously activated by Cu2^+ and Mn2^+ ion. Adding maltose in the substrate can induce the production of α - glucosidase by E. coil transformant.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503