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抑瘤基因NGX6启动子的克隆与功能鉴定
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:生物化学与生物物理进展
  • 时间:0
  • 页码:1082-1089
  • 语言:中文
  • 分类:Q257[生物学—细胞生物学] R735[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]中南大学湘雅三医院消化内科,长沙410013, [2]中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,长沙410078
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划(973)(2006CB910503),国家自然科学基金(30770972),湖南省自然科学基金项目(09JJ3066,07JJ3075)和中南大学研究生学位论文创新工程(2009bsxt042)资助项目.
  • 相关项目:NGX6基因在人结肠癌中调控Wnt信号通路的分子机制研究
中文摘要:

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用Promoterlnspector program,FistEF,CpGplot和Matlnspector Professional软件分析发现,NGX6基因转录调控区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区.凝胶迁移阻滞实验确定NGX6基因启动子区域具有Spl特异性结合位点,Spl特异性阻断剂光神霉素(mithramycin A)能明显抑制NGX6启动子的活性和NGX6基因的表达;封闭内源性Spl能下调NGX6基因mRNA表达水平.

英文摘要:

Transcriptional regulation mechanisms have not been clearly illuminated for NGX6 gene, which is a candidate of tumor suppressor gene in colorectal cancer, pGL3/Enhancer/1126 vector, a recombinant reporter gene vectors of the transcription regulatory region of NGX6 gene, was constructed based on bioinformatic techniques and identified by luciferase assay system. No canonical TATA boxes, but several CAAT and GC boxes were observed in the transcription regulatory region by the online analysis programs Promoterlnspector program, FistEF, CpGplot and Matlnspector Professional. Transcriptional factor Sp 1 was validated to bind to NGX6 promoter by electrophoretic mobility shift assay (EMSA). Inhibition of the Sp 1 binding to NGX6 promoter by mithramycin A significantly reduced the promoter activity. The endogenous expression of NGX6 in mRNA level was down-regulated by mithramycin A and blocking with Spl.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821