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利用杆状病毒表达载体系统表达重组乙型肝炎病毒核心蛋白
  • ISSN号:1672-0741
  • 期刊名称:《华中科技大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R329.29[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所,武汉430030, [2]中国科学院武汉分院病毒研究所,武汉430071
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30330680)
中文摘要:

目的利用杆状病毒表达载体系统制备重组乙型肝炎病毒核心蛋白。方法构建含有HBVC基因的杆状病毒转移载体pFastBac Dual—HBV core,转化大肠埃希菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞Sf9,获得含有HBVC基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染Sf9细胞进行乙型肝炎病毒核心蛋白表达,然后通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达情况。结果成功构建了含HBVC基因的重组杆状病毒,而且在昆虫细胞Sf9中表达了乙型肝炎病毒核心蛋白。结论利用Bac to Bac杆状病毒表达系统,成功地表达了乙型肝炎病毒核心蛋白,为进一步研究奠定了基础。

英文摘要:

Objective To produce recombinant HBcAg in insect cells by Baculovirus expression vector system. Methods HBV core gene was amplified by PCR and cloned into pFastBac Dual vector to construct the recombinant plasmid pFastBac Dual-HBV core, using pMD18-T Simple Vector as a mediator. Then the recombinant plasmid pFastBae Dual-HBV core was transformed into DH10Bac competent cells for transposition, after which the recombinant Bacmid DNA was isolated and transfected into Sf9 insect cells by lipofectamine. Three days later, recombinant baculovi.ruses were harvested to infect Sf9 cells and the expression levels were detected by SDS-PAGE and Western blotting after infection. Results The recombinant baculovirus containing HBV core gene was constructed successfully and HBeAg was expressed in insect cells at a high level. Conclusion The recombinant HBcAg was successfully expressed in insect cells with Bac to Bac expression system, which lays the foundation for further research.

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期刊信息
  • 《华中科技大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:华中科技大学
  • 主编:陈建国
  • 地址:武汉航空路13号
  • 邮编:430030
  • 邮箱:zhengm@mail.tjmu.edu.cn
  • 电话:027-83692530
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-0741
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1678/R
  • 邮发代号:38-37
  • 获奖情况:
  • 1996年第二届全国优秀科技期刊二等奖,1999年全国高等学校优秀自然科学学报一等奖,1999年湖北省出版佳作奖、省优秀期刊,2006年湖北省优秀科技期刊,2) 2008年教育部第二届中国高校优秀科技期刊奖,2010年教育部第三届中国高校优秀科技期刊奖,2011年第七届湖北省医学优秀精品期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:10596