中文摘要：

目的：克隆人Lumican基因及构建Lumican基因真核表达载体并研究其对人子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖的影响。方法：取人新鲜正常子宫内膜组织，提取总RNA，采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增Lumican基因，将该基因定向克隆到真核表达载体pEGFP—N。中，构建真核细胞表达载体pEGFP—N。一Lumican，用限制性内切酶酶切分析，DNA序列分析鉴定重组质粒；将测序正确的Lumican基因通过脂质体介导下转染人子宫内膜癌细胞HEC一1A；逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和WesternBlot检测转染细胞HEC-1A的LumicanmRNA和蛋白表达。采用MTT法观察转染Lumican基因的人子宫内膜癌细胞HEC一1A的增殖能力。结果i重组质粒pEGFP—N，-Lumican经觑以Ⅲ和Band／I酶切，获得8311bp片段和865bp插入片段，序列分析表明插入的片段与GeneBank发布的序列一致；荧光显微镜下可见转染的HEC-1A细胞有绿色荧光蛋白的表达；转染细胞HEC-1A的LumicanmRNA表达上调，Lumican蛋白相对上调率为74．62％（P〈0．05）。与对照组细胞比较，转染Lumican基因的人子宫内膜癌细胞HEC-1A的抑制率为21．35％±2．78％。结论：成功构建了真核表达载体pEGFP—N，-Lumican，该载体在体外能有效抑制人子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖能力，为以Lumican基因为靶点研究其对人子宫内膜癌细胞HEC-1A的恶性生物学特性提供实验基础。