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特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究
  • ISSN号:1673-9078
  • 期刊名称:《现代食品科技》
  • 时间:0
  • 分类:Q522[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006
  • 相关基金:国家自然科学基金重大研究项目(90412015); 教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130); 国家科技基础条件平台项目(2005DKA64001); 科技部基础学科平台建设生物计算网络平台项目(2005DKA64001); 广州市科技攻关计划(2005Z12E4023)资助项目
中文摘要:

本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和WesternBlot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果。结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%。合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达。

英文摘要:

The mcl-l gene-specific siRNA plasmids were constructed and transfected into HepG2.The levels of mcl-1 mRNA and Mcl-1 protein expression were detected with the Rt-PCR(real time PCR) and WesternBlot methods,respectively.And the inhibitory effects of siRNA plasmid corresponding to two different sites on mcl-1 expression were compared.Rt-PCR results showed that both the two siRNA plasmids correspomding to two sites could reduce the levels of mcl-1 mRNA and the maximum inhibition efficiency was of 70.0%,which was much higher than that of a control group.Western-Blot results were showed that transfection of mcl-l gene-specific siRNA plasmids into HepG2.The expression of Mcl-1 protein obviously inhibit the expression of mcl-l protein with the maximum inhibition rate was 44.2%.It was concluded that the rational design of specific siRNA plasmid can significantly lower levels of mcl-1mRNA and inhibit the expression of Mcl-1 protein.

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期刊信息
  • 《现代食品科技》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:华南理工大学
  • 主办单位:华南理工大学
  • 主编:李琳
  • 地址:广州市天河区五山路华南理工大学麟鸿楼号508室
  • 邮编:510640
  • 邮箱:xdspkj@vip.sohu.com
  • 电话:020-87112373
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-9078
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1620/TS
  • 邮发代号:46-349
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘
  • 被引量:20414