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传染性法氏囊病病毒凋亡调节蛋白表达细胞株的建立
  • ISSN号:1005-4545
  • 期刊名称:《中国兽医学报》
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]浙江大学动物预防医学研究所,浙江杭州310029, [2]浙江大学生命科学学院,浙江杭州310029
  • 相关基金:国家自然科学基金重点资助项目(30230270)
中文摘要:

构建传染性法氏囊病病毒非结构蛋白基因(NS)的重组表达质粒pEGFP-C2-NS,然后在LipofectamineTM 2000介导下转染Vero细胞,活细胞状态下直接观察EGFP-NS蛋白在细胞中的表达与定位。结果显示,转染后4~5 h出现荧光蛋白表达,24 h达到高峰,呈小点样环核膜与细胞膜附近沉积,经G418筛选2~3周后稳定表达的荧光蛋白主要分布于细胞膜上。G418抗性细胞,经RT-PCR和Western-blot验证NS mRNA及其蛋白表达,提示已建立能稳定表达EGFP-NS蛋白的细胞株,所表达蛋白具有NS和EGFP双重活性,为进一步研究NS蛋白凋亡调节机制打下了基础。

英文摘要:

The recombinant plasmid pEGFP-C2-NS was transfected into Vero cells by the LipofectamineTM 2000,ring-like patches of EGFP-NS protein were observed in close proximity to the perinuclear and cellular membrane of Vero cells 4-5 h after transfection,and reached the peak after 24 h,furthermore were distinctively disposed in cellular membrane of the cells which obtained by G418 screening after 2-3 weeks.Transcription and translation of NS gene of IBDV were confirmed by RT-PCR and Western-blot analyses in G418-resistant cell line.The results may be of great value for further investigation of the regular mechanism of NS protein on apoptosis.

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期刊信息
  • 《中国兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学
  • 主编:王哲
  • 地址:吉林省长春市西安大路5333号
  • 邮编:130062
  • 邮箱:xbcjvs@163.com
  • 电话:0431-87836531 87836534
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-4545
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1234/R
  • 邮发代号:12-105
  • 获奖情况:
  • 第二届全国优秀科技期刊评比二等奖,连续多次被评为全军优秀医学期刊一等奖,全国高校优秀自然科学学报评比一等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18973