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一种有效记录成骨细胞 L 型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法
  • ISSN号:1000-4718
  • 期刊名称:《中国病理生理杂志》
  • 分类:R33-33[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学] R363[医药卫生—病理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]复旦大学基础医学院生理与病理生理学系,上海200032, [2]复旦大学药学院药理学教研室,上海201203, [3]Research Center,Montreal Heart Institute,Montreal,Canada
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.81370979)
中文摘要:

目的:探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳,以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法:以成骨细胞为研究对象,采用β-七叶素穿孔全细胞膜片钳技术,记录骨细胞L型钙通道电流。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。

英文摘要:

AIM:To establish a perforated whole-cell patch-clamp technique withβ-escin to record L-type cal-cium current (ICa,L) in osteoblasts.METHODS:ROS 17/2.8 is a rat osteoblast-like osteosarcoma cell line.β-escin was applied to the pipette solution to permeabilize the cell membrane and the perforated patch recording mode was obtained. RESULTS:β-escin at concentration of 50μmol/L easily permeabilized the cell membrane and obtained a perforated patch recording mode in 2~7 min.This technique prevented ICa,L rundown and preserved cytoplasmic signaling pathways.CON-CLUSION:β-escin may be used as an alternative ionophore for perforated patch-clamp studies in osteoblasts and results in minimal rundown that could facilitate recordings of ICa,L in osteoblasts.

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期刊信息
  • 《中国病理生理杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国病理生理学会
  • 主编:陆大祥
  • 地址:广东省广州市黄埔大道西601号
  • 邮编:510632
  • 邮箱:obsbjbb@jnu.edu.cn
  • 电话:020-85220269
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4718
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1187/R
  • 邮发代号:46-98
  • 获奖情况:
  • 1997-2000年连续获得中国科协优秀基础性和高科技...,1992、1996、2000、2004、2008年,连续五次入选中...,2008-2010年,连续三年荣获“百种中国杰出学术期...,2010年获广东省期刊最高奖——品牌期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:37010