以改良CTAB法提取的广藿香叶片DNA为模板,采用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4因素3水平,对SRAP扩增效果进行研究,比较不同模板DNA浓度对PCR扩增的影响,确立适合广藿香SRAP—PCR反应的最佳体系。利用SRAP—PCR优化体系对引物进行了全面筛选。结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响,总体积20止的SRAP—PCR优化反应体系中含有:2μL10×buffer、20ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、250μmol/LdNTP、0.3μmol/LPrimer、TaqDNA聚合酶1.5u。运用该体系对部分广藿香单株进行检验,证明该体系稳定可靠;以此体系为基础从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物18对。