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腺相关病毒载体在各种细胞株中的感染效率及表达特性研究
  • ISSN号:1672-8270
  • 期刊名称:中国医学装备
  • 时间:2015.7.15
  • 页码:1-4
  • 分类:R450[医药卫生—治疗学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:辽宁医学院第二炮兵总医院研究生培养基地, 第二炮兵总医院, 解放军第307医院胸外科, 中国疾病预防控制中心辐射防护与核医学安全所 辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室
  • 相关基金:国家自然基金科学部主任基金(31340051)“腺病毒Ad-pig3RRP-PIAS3对辐射诱导肺腺癌细胞转移的抑制作用及其机制研究”;国家自然科学基金青年科学基金(81202151)“低剂量辐射对树突状细胞迁移能力的影响及其分子机制研究”;国家自然科学基金青年科学基金(81001216)“NOK激酶促进肿瘤细胞周期进程及提高肿瘤细胞辐射敏感性分子机制研究”;全军医学科技“十二五”科研项目(CWS12J082)“快速PCC-FISH方法作为辐射生物剂量计的研究”;中国疾病预防控制中心青年科研基金(2015A201)“利用负载lewis细胞的小鼠模型评价低剂量辐射对机体抗肿瘤免疫功能的影响”
  • 相关项目:低剂量辐射对树突状细胞迁移能力影响及其分子机制研究
中文摘要:

目的:研究腺相关病毒载体(AAV)感染各类正常细胞和肿瘤细胞的效率,为相关研究提供参考。方法:利用脂质体将重组腺相关病毒的包装质粒AAV-DJ、Helper以及表达绿色荧光蛋白(GFP)的穿梭质粒AAV-GFPP转染293FT细胞进行病毒包装,收集病毒液后感染2种正常细胞和14种肿瘤细胞,24 h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达,并随机选取3个视野统计感染GFP的细胞数目。结果:GFP重组腺相关病毒对各种细胞的感染效率存在差别,感染效率最高的为293FT细胞(占96.2%)和Hela细胞(占81.86%),对SCG7901、SEM-M和SP20细胞的感染效率近乎为零。结论:GFP重组腺相关病毒对正常细胞293FT感染效率最高,对肿瘤细胞Hela、SMC7721、BGC823、PANC-1、A549、A875、C6和MCF-7的感染效率较高,这类细胞适合使用AAV作为载体进行外源基因的导入及功能研究。

英文摘要:

Objective:To Study on transfection effection and expression of recombinant adeno-associated virus in kinds of cell lines.Methods:Packaging 293FT cells with the packaging plasmids AAV-DJ, Helper, and shuttle plasmids, AAV-GFP of recombined adeno-associated virus by liposome. Collect the solution of virus and infect 2 normal cells and 15 kinds of cancer cells. 24hours after infection, the efficacy of adenoviral transfered into kinds of cells was assessed by quantification of GFP-positive cells under an inverted fluorescence microscope. Count cells in 3 random sights under microscope.Results:The efficiency of GFP recombinant adeno-associated virus is various in these kinds of cells. The highest efficiency shows in 293FT cells and Hela cells, 96.2% and 81.86%. Conversely the efficiency is approximately 0 in SCG, SEM-M, SP20 cells.Conclusion: Due to the high and relatively high transfection efficiency of the AAV-GFP in normal cells, 293FT, and cancer cells, Hela, SMC7721, BGC823, Panc-1, A549, A875, C6, MCF-7, it is available to do some genetic therapy researh using AAV as a vector.

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期刊信息
  • 《中国医学装备》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国医学装备协会
  • 主编:崔泽实
  • 地址:北京市西城区南纬路27号305-307室
  • 邮编:100050
  • 邮箱:
  • 电话:010-63028803 63029869
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-8270
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5211/TH
  • 邮发代号:80-373
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:10509