位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
系列功能区缺失的猪内源反转录病毒5’非编码区的构建及序列分析
  • ISSN号:1005-4545
  • 期刊名称:《中国兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.659.3[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070, [2]军事医学科学院野战输血研究所,北京100850, [3]农业部兽医诊断中心,北京100094
  • 相关基金:北京市自然科学基金资助项目(5053028);中国博士后科学基金资助项目(2003033195);国家自然科学基金资助项目(30270989)
中文摘要:

为构建缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5'非编码区(5’UTR)克隆,分析5’UTR的转录调控规律,以质粒WZSP-293—5’UTR为模板,应用重组PCR方法分别扩增5’UTR与缺失引物结合区及前导序列(PBS—Leader),即51UTR(5'长末端重复区)、U3区、R区、U3区中重复序列的51UTR等5种PCR片段,并分别将其克隆至T载体上,挑取阳性克隆,酶切鉴定插入方向,选择正确方向插入的克隆,删序并进行序列分析。结果表明,构建了系列功能区缺失的5种51UTR克隆,分别命名为UTR—PMD、LTR—PMD、UTR—U3-PMD、UTR-R—PMD、UTR—U—PMD以备后用。结论:在PERV5'UTR的不同功能区中含有一系列可能的转录因子结合位点;中国五指山猪内源性反转录病毒(WZSP—PERV)在293细胞中传代时,不仅U3重复区数目增加,重复亚型也发生了一定的改变。

英文摘要:

To analyze the transcriptional regulation of PERV untranslated region,A series of functional region deletion of PERV 5'UTR were cloned ,including completed 5'UTR, 5'UTR lacking of PBS and Leader (5'UTR), 5' UTR lacking of U3 region,5'UTR lacking of R region,5'UTR devoid of the U3 repeat box. First,we use PCR to amplify the above five fragments,then ligated them to pMD18-T vector,chose the positive clones,restricted them with enzymes to identify the orient of the inserts. The plasmids LTR-PMD,UTR-PMD,UTR-U3-PMD,UTR-RPMD,UTR-U-PMD were constructed for further use,the 5'UTR sequenced and the potential binding of transcription factors(TFS) predicted by the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG). It is concluded that there have different potential binding of TFS different functional region of PERV 5'UTR;When passaging the WZSPPERV in HEK293 cells ,not only the number of U3 repeat box increased but also the subtype changed.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学
  • 主编:王哲
  • 地址:吉林省长春市西安大路5333号
  • 邮编:130062
  • 邮箱:xbcjvs@163.com
  • 电话:0431-87836531 87836534
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-4545
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1234/R
  • 邮发代号:12-105
  • 获奖情况:
  • 第二届全国优秀科技期刊评比二等奖,连续多次被评为全军优秀医学期刊一等奖,全国高校优秀自然科学学报评比一等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18973