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基于 CRISPR/Cas9系统高通量筛选研究功能基因
  • ISSN号:0253-9772
  • 期刊名称:《遗传》
  • 时间:0
  • 分类:Q987[生物学—遗传学;生物学—人类学]
  • 作者机构:[1]北京大学工学院生物医学工程系,北京100871, [2]北京大学生物膜和膜技术国家重点实验室分子医学研究所,北京100871, [3]北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京100871
  • 相关基金:科技部项目(编号:2011CB809106,2012AA020103),国家自然科学基金委项目(编号:81030040,30600142,81325010)和北京分子科学国家实验室开放课题基金(编号:20140118)资助
中文摘要:

利用功能缺失型(Loss-of-function)或者功能获得型(Gain-of-function)策略高通量筛选功能基因,是研究人员快速寻找调控特定表型的重要或关键基因的主要方法。RNA 干扰(RNA interference,RNAi)的遗传筛选方法因操作简单、成本相对较低等优势,尽管已经得到了广泛的应用,然而其抑制效果不完全、脱靶效应明显等劣势依然存在。近年来兴起的 CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat sequences/CRISPR-associated protein 9)技术能快速、简便、准确地实现基因组敲除等编辑功能,因而成为一种强大的遗传筛选工具;在各种细胞系、人和小鼠及斑马鱼等多种模式动物中,大规模运用该方法筛选功能基因已经取得了巨大成功。本文总结了 CRISPR/Cas9技术的特点,将其与传统基因工程方法进行了分析比较,回顾了近期相关的高通量功能基因筛选工作,最后探讨了该技术未来的发展趋势。

英文摘要:

High-throughput screening, a powerful tool for the discovery of functionally important genes respon-sible for certain phenotypes, is performed according to loss-of-function or gain-of-function strategies. RNAi tech-nology or knockout approaches have been widely used in high throughput screening due to their advantages of ease use, low cost and so on. However, imcomplete knockdown activity and off-target effect hindered their utility. More recently, CRISPR/Cas9 technology is becoming a robust tool for genome editing in diverse cells or animals, since it could generate a gene mutation in a target-specific manner. In this review, we first summarize the characterization of CRISPR/Cas9 and make comparison with traditional genetic tools, then describe recent achievements of genetic screen in several model organisms using CRISPR/Cas9, finally discuss on its future challenges and opportunities.

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期刊信息
  • 《遗传》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国遗传学会
  • 主编:张永清
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院中国科学院遗传发育所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:yczz@genetics.ac.cn
  • 电话:010-64807669
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-9772
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1913/R
  • 邮发代号:2-810
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,《CAJ-CD》执行优秀奖,2008年12月获“中国精品科技期刊”证书和北京市印...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:23270