核糖核酸小分子(miRNA)已成为全球包括生命科学、生物医学、药物学等诸多领域关注的焦点,其调节功能涉及到细胞的生长、发育、分化以及癌变的所有生命活动中,是公认的主要基因调控家族之一。有证据表明,用miRNA表达谱对癌症进行分型比其它方法更为精确可靠,从而有望成为新一代的具有潜在重要意义的分子标记和药物靶点。因此,研究特定细胞miRNA的表达图谱、筛选未知miRNA、探究每种miRNA的功能成为当前的研究热点。然而,所有这些工作的开展和深入都离不开高特异性、高灵敏度的miRNA 分子检测技术。目前的检测方法如Northern Blot、微阵列芯片等,都因miRNA碱基数过少、序列高度相似等特点而具有一定的缺陷,如低效,错配,高成本等,远远不能满足后基因组时代高通量检测的需求。 在本项目资助下,针对现有技术的缺陷,我们成功开发出两款具有自主知识产权产权的miRNA定量检测方法。灵敏度分别达到每个反应检测1000或100000拷贝数,并具有单碱基突变检测能力。鉴于miRNA的重要性,我们相信这些技术将具有很好的产业化前景。
英文主题词miRNA; quantitative examination; isothermal amplification; high sensitive