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猪带绦虫Ddi1-like蛋白的真核表达及其抗血清的制备
  • ISSN号:1673-4696
  • 期刊名称:《中国兽医科学》
  • 时间:0
  • 分类:S852.734[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划(973)项目(2015CB150300)
中文摘要:

为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果,成功利用RACE获得Ddi1-like基因的全长cDNA序列;在真核表达系统中,绦虫上的Ddi1-like重组蛋白获得表达;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,获得重组蛋白即为Ddi1-like蛋白;免疫后获得抗血清,其效价达到1∶12 800。上述结果为后续研究Ddi1-like蛋白的酶切活性研究提供了基础。

英文摘要:

To functionally study the DNA damage-inducible-like (Ddil-like) protein from Teania solium,according to gene annotations of K solum genome in GeneDB,the cDNA of Ddil-like gene was ampli- fied by RACE (rapid-amplification of cDNA ends) technique using the specific 5'and 3'primers,and was then cloned into vecter pPIC9K. Then the recombinant protein was induced in E pastoris. New Zealand white rabbits were immuned by the purified recombinant Ddil-like protein to produce the anti-serum. In result,the full ORF of Ddil-like gene was successfully obtained. The recombinant Ddil-like protein was produced in~pastoris expression system. The recombinant protein expression was confirmed by SDS-PAGE and Western-blot analysis. The antibody titer of the anti-serum could reach to 1:12 800. The above-men- tioned results lay a foundation to further studies on the proteolytic activity of the Ddil-like protein.

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编:殷宏
  • 地址:兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编:730046
  • 邮箱:zgsykx@zgsykx.com
  • 电话:0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4696
  • 国内统一刊号:ISSN:62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6141