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同步化处理后小鼠成纤维细胞表观遗传水平的相对定量分析
  • ISSN号:1000-2286
  • 期刊名称:《江西农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q954.4[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]中国科学院昆明动物研究所/云南省动物生殖生物学重点实验室,云南昆明650223, [2]绍兴文理学院生命科学学院,浙江绍兴312000
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30700159/C100202); 浙江省“生物医学工程”学科开放基金项目(SWYX0907)
中文摘要:

供体细胞的同步化处理可能改变其表观遗传特性,进而影响胚胎的克隆效率。研究同步化处理对小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonicf ibroblasts,MEFs)组蛋白H3K9甲基化、乙酰化及组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化表达的影响。分离培养MEFs,增殖稳定的第3代MEFs分别用5mL/L血清饥饿处理4d或15mL/LDM-SO处理2d使细胞处于增殖抑制期,通过免疫组化染色和Image-J图像处理软件,相对定量比较不同处理情况下组蛋白H3K9甲基化、乙酰化和组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化变化情况。Ki-67染色检测结果表明,两种同步化处理可使细胞处于G0期或G1期。DMSO处理使MEFs组蛋白H3K9乙酰化表达水平升高,而5mL/L血清饥饿处理则使其表达水平下降;此外,两种同步化处理均导致组蛋白H3K9甲基化和H3K4单甲基化表达下降,但不影响组蛋白H3K4三甲基化的表达水平。研究结论表明:同步化处理可改变MEFs组蛋白乙酰化和甲基化表达水平,进而有可能影响胚胎克隆效率。

英文摘要:

Synchronizion of donor cell cycle might affect epigenetic pattern of donor cells,which might have a further impact on the efficiency of embryo cloning.In this study,the effect of serum starvation or DMSO on histone H3K9 methylation,acetylation and H3K4 single-methylation,triple-methylation in mouse embryo fibroblasts (MEFs) was studied.MEFs at the third passages were synchronized by treating with 5 mL/L serum for 4 days or 15 mL/L DMSO for 2 days.Histone H3K9 methylation,acetylation and H3K4 single-methylation,triple-methylation were detected by fluorescence microscope and analyzed by Image-J image processing software.Ki-67 staining showed that both serum starvation and DMSO were efficient in synchronizing cell into G0 or G1 stage of cell cycle.Compared with the control groups,the H3K9 acetylation in the serum starvation groups was significantly reduced,while H3K9 acetylation in the DMSO groups was remarkably increased.In addition,both serum starvation and DMSO treatment reduced the histone H3K4 single-methylation and H3K9 methylation,but H3K4 triple-methylation was not changed.Thus,the results clearly proved that synchronization treatment obviously changed histone methylation and acetylation in MEFs,which might further affect the cloning efficiency of embryos.

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期刊信息
  • 《江西农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江西农业大学
  • 主办单位:江西农业大学
  • 主编:石庆华
  • 地址:江西省南昌市经开区志敏大道1101号江西农业大学期刊社
  • 邮编:330045
  • 邮箱:ndxb7775@sina.com
  • 电话:0791-83813246 83828010
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2286
  • 国内统一刊号:ISSN:36-1028/S
  • 邮发代号:44-102
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵双百期刊,国家期刊奖百种重点期刊,中国高校精品科技期刊,华东地区优秀期刊,江西省"名刊建设工程"期刊,江西省优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:20807