从成年的正常猕猴的肝脏分离细胞进行原代培养,筛选最适细胞培养条件,并利用流式细胞技术把E-cad阳性细胞富集到99.8% 。通过细胞的表达分析(RT-PCR,细胞免疫荧光染色),发现该细胞具有肝脏前体细胞的某些特性,如同时表达部分肝细胞(albumin, APOH)和胆管细胞(IB4, CX43)的细胞标记,以及转录因子HNF1β and HNF3β。另外,该细胞还可以传代约20次并保持细胞特性。细胞分化结果表明细胞可以分化肝细胞,并呈现肝细胞的功能,可以储存糖原、吸收ICG和产生脂滴;另外,细胞也可以分化为胆管细胞。把PKH26标记的细胞经脾脏移植到急性肝脏损伤小鼠,发现细胞可以在受体小鼠的肝脏存活、整合、增殖,并分化为肝细胞。以上结果表明我们分离得到的细胞为肝脏前体细胞。在以上工作的基础上,我们从新生猕猴的肝脏也分离得到了肝脏前体细胞,该细胞也能分化为肝细胞和胆管细胞。与成体肝脏前体细胞不一样的是,新生猕猴肝脏分离得到的肝脏前体细胞可以在无血清的培养体系生长,并表达CD49f和nestin。成体猕猴肝脏前体细胞通过上皮-间质转化,分化为肌成纤维细胞。
英文主题词Rhesus monkey; liver; epithelial cells; progenitor cells; EMT