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雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤对RAW264.7细胞中8种miRNAs表达的影响
  • ISSN号:1000-8861
  • 期刊名称:《免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392.12[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]宁夏医科大学临床医学院医学检验系,银川710004, [2]宁夏医科大学临床医学院基础医学院医学遗传系与细胞生物学系,银川710004
  • 相关基金:国家自然科学基金(31472168);宁夏科技创新领军人才项目(2015年)
中文摘要:

目的探究雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)处理对RAW264.7细胞中miR-181c,miR-101b和miR-1192等8种自噬相关miRNAs的表达水平,为研究miRNAs在细胞自噬中的功能提供理论基础。方法生物信息学预测分析与细胞自噬相关的miRNAs并构建miRNAs调控细胞自噬的网络图;分别用Rapa和3-MA对RAW264.7细胞做不同条件处理,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测不同条件处理后RAW264.7细胞中miR-181b、miR-181c、miR-101b、miR-1192、miR-362-3p、miR-590-3p、miR-875-5p和miR-335-5p的相对表达量。结果生物信息学预测结果显示8种miRNAs可能分别靶向作用于细胞自噬通路中多个关键蛋白,对细胞自噬起到促进或抑制作用;与正常对照组相比,miR-181c、miR-101b、miR-1192、miR-362-3p、miR-335-5p、miR-875-5p在Rapa处理RAW264.7细胞组中表达显著下调(P〈0.05)。结论 miR-181c、miR-101b等7种miRNAs可能在RAW264.7巨噬细胞自噬过程中发挥重要调控作用。

英文摘要:

This study was performed to determine the expression levels of miR-181c, miR-101b and miR-1192 etc. in mouse RAW264.7 cells and provide a theoretical basis for exploring the function of miRNAs in macrophage autophagy. Bioinformatics analysis was used to predict autophagy-related miRNAs and establish miRNAs-regulated network of autophagy. The relative expression of miR-181b, miR-181c, miR-101b, miR-1192,miR-362-3p, miR-590-3p, miR-875-5p and miR-335-5p were detected by qRT-PCR in RAW264.7 cell models pre-treated with different conditions of Rapamycin(Rapa) or 3-methyladenine(3-MA). The results of bioinformatics showed that eight miRNAs could target key proteins in autophagy pathway, which may facilitate or inhibit autophagy function. Compared with the normal control, the expression of miR-181c, miR-101b, miR-1192,miR-362-3p, miR-335-5p and miR-875-5p in RAW264.7 cells was significantly down-regulated after Rapatreatment(P〈0.05), while markedly up-regulated in the 3-MA treatment group(P〈0.05); however, the opposite expression level variation of miR-181b was observedunder the same conditions as above(P〈0.05). The expression of miR-590-3p had no change after anytreatments(P〉0.05). In conclusion, our research suggest that, except for miR-590-3p, other seven miRNAs present remarkably differential expression and thus play critical regulatory roles in RAW264.7 mousemacrophage autophagy.

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期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编:吴玉章
  • 地址:重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编:400038
  • 邮箱:richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023-68752237
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8861
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13273