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PDE5基因siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响
  • ISSN号:1009-3591
  • 期刊名称:《中华男科学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R698.1[医药卫生—泌尿科学;医药卫生—临床医学;医药卫生—外科学] R454.9[医药卫生—治疗学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]北京大学人民医院,泌尿外科,北京100044, [2]北京大学人民医院中心实验室,北京100044, [3]大庆油田总医院泌尿外科,黑龙江大庆163001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30150002,30371419)
中文摘要:

目的:观察PDE5基因小干扰RNA(siRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为阴茎勃起功能障碍(ED)的基因治疗提供实验依据。方法:使用美国Ambion公司提供的设计软件设计并合成人PDE5基因的siRNA序列,合成3对PDE5siRNA和1对阴性对照siRNA,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设定空白转染组为对照组。以酶联免疫法分别检测转染后不同时间(24、48、72、96h)点海绵体平滑肌细胞内cGMP浓度变化,观察PDE5siRNA对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:siRNA1、siRNA2和siRNA3转染后人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平显著高于阴性对照siRNA组和空白对照组(P〈0.05),在转染后72h最为显著,siRNA1、siRNA2、siRNA3、阴性对照siRNA和空白对照组cGMP测定值分别为:5.89±0.19、3.52±0.16、2.88±0.08、0.72±0.12、0.60±0.16pmol/ml,siRNAl组明显高于siRNA2、siRNA3组(P〈0.05)。结论:体外化学合成的PDE5siRNA能有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,不同序列siRNA增加cGMP水平的能力不同,为ED的基因治疗提供了新思路。

英文摘要:

Objective: To investigate the effect of phosphodiesterase type 5 (PDE5) small interfering RNA (siRNA) on the cGMP in the smooth muscle cells of human corpus cavernosum, and to provide an experimental groundwork for the gene therapy of erectile dysfunction (ED). Methods: Small interfering RNAs targeting PDE5 gene were synthesized by using web design software provided by Ambion, three siRNAs and a control siRNA were synthesized by Ambion. siRNAs were transfected into the smooth muscle cells of human corpus cavernosum by using siPORTTM Lipid reagent, cGMP was detected by ELISA at different times (24, 48, 72 and 96 h) after transfection. Results : The cGMP levels of the siRNA1, siRNA2 and siRNA3 groups were significantly higher than those of the siRNA control and blank control groups(P 〈0.05 ), and so was it in the siRNA1 group than the siRNA2 and siRNA3 groups (P 〈 0.05 ), with significant difference between the siRNA control and the blank control group(P 〉 0.05 ). Conclusion: The synthesized siRNAs in vitro are capable of increasing the level of cGMP in the smooth muscle cells of human corpus cavernosum, different siRNAs with different capabilities. The siRNA technique could provide not only an extremely powerful tool for the functional analysis of genome but also a new approach to ED gene therapy.

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期刊信息
  • 《中华男科学杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:南京军区联勤部卫生部
  • 主办单位:南京军区南京总医院
  • 主编:商学军
  • 地址:南京市中山东路305号
  • 邮编:210002
  • 邮箱:editor@androl.cn
  • 电话:025-80860178
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-3591
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1578/R
  • 邮发代号:28-257
  • 获奖情况:
  • 国家科技部中国科技论文统计源期刊,中国科学引文数据库医学类核心期刊,中国期刊方阵军队双效科技期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15041