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1-磷酸鞘氨醇2型受体调控衰老内皮细胞的功能变化
  • ISSN号:1672-7347
  • 期刊名称:《中南大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中南大学 湘雅三医院医学实验中心, [2]中南大学 生物科学与技术学院生物化学教研室,长沙410013
  • 相关基金:国家自然科学基金(81070277 30872709); 湖南省自然科学基金(12JJ6093); 湖南省科技厅项目(2010FJ3055).
中文摘要:

目的:通过上调和沉默1-磷酸鞘氨醇2型受体(S1P2)的表达,探讨其对体外培养的脐静脉内皮细胞的功能影响。方法:采用转染外源S1P2受体质粒上调年轻脐静脉内皮细胞S1P2受体表达;应用RT-PCR和Western印迹检测空白对照组、空载体组和过表达组细胞的S1P2受体表达;同时采用Matrigel胶种植法,观察3组脐静脉内皮细胞的体外管状样结构生成能力;划痕实验分析内皮细胞的损伤愈合能力;迁移实验分析内皮细胞的化学趋化能力。以及通过RNA干扰沉默衰老脐静脉内皮细胞S1P2受体的表达,观察细胞的功能改变。结果:上调年轻脐静脉内皮细胞S1P2受体表达后,过表达组内皮细胞的成管能力、损伤愈合能力和细胞迁移率均明显低于空白对照组和空载体组(P〈0.05)。RNA干扰沉默衰老脐静脉内皮细胞S1P2受体后,干扰组内皮细胞的管状样结构生成能力、损伤愈合能力和趋化能力均明显恢复,显著高于衰老内皮细胞组和干扰对照组(P〈0.05)。结论:S1P2受体调控体外衰老内皮细胞的趋化、形态发生和损伤愈合反应的功能变化。

英文摘要:

Objective: To investigate the variation of senescent endothelial function by regulating the sphingosine-1-phosphate receptor type 2(S1P2) expression in cultured human umbilical vein endothelial cells(HUVECs).Methods: The S1P2 receptor expression was regulated by transfecting the cDNA or shRNA of S1P2 in cultured HUVECs.The expression levels of S1P2 receptor in HUVECs were detected by RT-PCR and Western blot.EC chemotaxis was measured by the transwell migration assay.The wound healing assay was performed by a scratch wound model on EC monolayer.Matrigel morphogenesis assay was employed to assess the in vitro angiogenic responses.Results: After up-regulating the S1P2 expression in young ECs,the S1P-stimulated formation of a tubular-like network in Matrigel was dramatically diminished in transfected ECs(P﹤0.05).Quantification of the wound healing assay showed that transfected ECs grew much slower than young ECs(P﹤0.05).The chemotactic capability was significantly decreased in transfected ECs(P﹤0.05).Furthermore,the senescent-associated impairments were revoked by the downregulation of S1P2 receptor in senescent HUVECs.Conclusion: The impaired functions(chemotactic,wound-healing and morphogenetic responses) in senescent HUVECs in vitro are mediated by S1P2 receptor.

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期刊信息
  • 《中南大学学报:医学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学
  • 主编:李桂源
  • 地址:湖南省长沙市湘雅路110号 中南大学湘雅医学院75号信箱
  • 邮编:410078
  • 邮箱:xyxb2005@vip.163.com xyxb2005@126.com
  • 电话:0731-84805495 84805496
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-7347
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1427/R
  • 邮发代号:42-10
  • 获奖情况:
  • 省优秀科技期刊一等奖,全国优秀科技期刊三等奖,1992、1996年,中国生物医学核心期刊,中国期刊方阵双效期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:11694