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大鼠肝脏前体细胞通过直接共培养抑制肝星状细胞的活化
  • ISSN号:1008-1704
  • 期刊名称:《肝脏》
  • 时间:0
  • 分类:R285.5[医药卫生—中药学;医药卫生—中医学]
  • 作者机构:[1]100050,首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81100294和81270519);高校新世纪优秀人才计划(NCET-09-0008);北京市自然科学基金资助项目(7132095)
中文摘要:

目的:观察大鼠肝脏前体细胞系(WB-F344)对肝星状细胞系(HSC-T6)活化及细胞外基质的影响。方法将慢病毒-GFP 空白载体转染的 HSC-T6与 WB-F344按1∶1与1∶2比例直接共培养3 d,使用流式细胞仪对其进行分选,慢病毒-GFP 空白载体转染的 HSC-T6单独培养作为对照,观察 HSC-T6活化指标及细胞外基质相关指标表达的变化。结果经流式细胞仪检验慢病毒-GFP 空白载体转染 HSC-T6的效率可达近90%;与 WB-F344直接共培养3 d 后,HSC-T6的细胞形态与对照组相比无差别;同时利用 GFP 对各组 HSC-T6细胞分选后,经流式细胞仪检验纯度可达94%;对分选后的细胞进行分析发现,直接共培养组 HSC-T6细胞活化标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在基因水平(1∶1与1∶2组分别是对照组的0.66与0.61倍,P<0.05)和蛋白水平(1∶1与1∶2组分别是对照组的0.61倍与0.25倍,P<0.05)的表达均下降;HSC-T6细胞的细胞外基质标记物 I 型胶原(Col-I)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达与对照组比较差异无统计学意义。结论WB-F344细胞可以抑制 HSC-T6细胞的活化,但在一定时间内对其细胞外基质的表达没有影响。

英文摘要:

Objective To explore the effects of HPCs (WB-F344)on activation and extracellular matrix (ECM)of HSCs (HSC-T6).Methods Lentivirus-GFP transfected HSC-T6 was directly cocultured with WB-F344 at 1 ∶1 and 1 ∶2 ratios for 3 days.Mixed cells were sorted by flow cytometry based on the presence or absence of GFP.Transfected HSC-T6 cultured alone was used as control.Expression of activation marker α-smooth muscle actin (α-SMA)and ECM markers collage I (Col-I),matrix metal proteinase-13 (MMP-13),tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP)-1 in HSC-T6 were observed by Western blot and real-time PCR.Results After 3 days of coculture with WB-F344,morphological changes of HSC-T6 remained unchanged in direct coculture groups.Transfection efficiency of Lentivirus-GFP was nearly 90% and the purity of sorted HSC-T6 was 94%.WB-F344 directly cocultured with HSC-T6 had reduced α-SMA expression of HSC-T6 in mRNA and protein level.However,there was no difference in ECM expression between control group and direct cocul-ture groups.Conclusion WB-F344 can inhibit the activation of HSC-T6,but it had no influence on expression of ECM.

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期刊信息
  • 《肝脏》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:上海市卫生局
  • 主办单位:上海市医学会
  • 主编:钱燕
  • 地址:上海市徐汇区沪闵路9585号
  • 邮编:200235
  • 邮箱:ganzang2010@163.com
  • 电话:021-54483359
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-1704
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1775/R
  • 邮发代号:4-613
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊
  • 被引量:12201