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PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定
  • ISSN号:1008-0589
  • 期刊名称:《中国预防兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S855.3[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210095
  • 相关基金:国家自然科学基金(30871868);国家科技支撑计划(2007BAD86B02-3,2006BAD06A04);江苏省科技攻关项目(BE2007342);教育部博士点基金项目(20060307007)
中文摘要:

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白2(NSP2)之间的差异和生物学特性,本研究根据PRRSV、S1、SY0608株NSP2基因序列保守区设计引物,通过RT—PCR扩增出两毒株的NSP2基因,克隆到pFastBac^TMHTB杆状病毒载体中,将筛选的阳性重组载体pF—S1-NSP2和pF-SY—NSP2,分别转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态大肠杆菌中,经蓝白菌落筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBac-S1-NSP2和rBac-SY-NSP2。在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rAc-S1-NSP2和rAc-SY—NSP2,Westernblot和间接免疫荧光实验结果表明,本研究成功构建了表达PRRSVS1和SY0608株NSP2蛋白的重组杆状病毒,表达的蛋白与自然感染PRRSV的猪血清均具有良好的反应原性,为进一步研究NSP2蛋白的功能及生物学和免疫学特性奠定了基础。

英文摘要:

The NSP2 genes of PRRSV were amplified by RT-PCR from PRRSV S1 and SY0608 strains, respectively and cloned into the baculovirus donor vector pFastBac^TMHTB. The recombinant plasmids pF-S1-NSP2 and pF-SY-NSP2 DNA were transformed into E.coli competent cells DH10Bac containing baculovirus shuttle vector. The recombinant bacmid (rBac-S1-NSP2 and rBac-SY-NSP2) were screened and verified by PCR. The bacmids were transfected into Sf9 insect cells and two recombinant baculovirus (rAc-S1-NSP2 and rAc-SY-NSP2) were obtained and confirmed by western blot and immunofluorescence assay with antibody against PRRSV. The recombinant NSP2 would be useful resource for studying on the function and immunogenicity of NSP2.

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期刊信息
  • 《中国预防兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  • 主编:步志高
  • 地址:哈尔滨市香坊区哈平路678号
  • 邮编:150001
  • 邮箱:zgyfsyxbhvri@163.com
  • 电话:0451-51051811 51051812
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-0589
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1417/S
  • 邮发代号:14-70
  • 获奖情况:
  • 全国农业优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12844