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纳米金增强复杂体系中PCR扩增低拷贝基因的反应特异性初步研究
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:《中国生物工程杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q819[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]上海交通大学生命科学技术学院Bio-X研究中心纳米生物学实验室,上海200040, [2]中国科学院上海生命科学信息中心,上海200031
  • 相关基金:国家自然科学基金重点项目(10335070)资助项目
中文摘要:

目的:利用纳米金颗粒提高复杂体系基因组低拷贝基因PCR扩增的反应特异性。方法:首先,模拟复杂基因组扩增模式体系,以接近单拷贝的hDNA为模板,在PCR过程中加入纳米金颗粒,设计优化实验,以便模拟建立复杂基因组低拷贝目的基因PCR扩增的模式体系。随后,扩增人类基因组的疾病相关的低拷贝基因模板(如人基因组肿瘤坏死因子基因外显子1的380bp),以检验纳米金优化增强PCR反应特异性的实际效果。结果:在复杂体系基因组的低拷贝基因PCR扩增中,纳米金颗粒能够较好地增强其PCR反应的特异性。结论:初步表明基于纳米金的纳米粒子PCR方法可以对复杂的实际基因组体系低拷贝基因的PCR扩增起到优化作用,这对于PCR反应优化方法的改进、推广具有重要的参考价值。

英文摘要:

Objective:Addition of gold nanoparticles (average diameterl0nm) into amplification system with low copy gene fragments from the complicated genome helps to enhance the specificity of PCR amplification. Methods:PCR amplification model system of the complicated genome was simulated, PCR was performed with approximate single copy k DNA as the template and addition of gold nanoparticles. The experiments were so repeated and optimized that the PCR amplification model system was built by simulating the PCR amplification of the complicated genome with low copy gene. Then, the low copy gene (tumor necrosis factor, TNF-ct gene exon 1 with 380bp ) of human genome was amplified so as to verify the actual efficiency of enhancement of the specificity of PCR amplification by the gold nanoparticles. Results:The gold nanoparticles could better enhance the specificity of PCR amplification in the PCR amplification of the complicated genome system with low copy gene. Conclusion:It was preliminarily indicated that nanoparticle PCR method based on gold nanoparticles could optimize the PCR amplification of the complicated actual genome system with low copy gene, which made an important valuable reference to improvement and extension of the optimized methods of PCR amplification.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959