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RNA干扰肝癌MHCC97-H细胞N-Ras基因对放射敏感性的影响
  • ISSN号:0254-5098
  • 期刊名称:《中华放射医学与防护杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R73-37[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]安徽省立医院肿瘤放疗科,合肥230000, [2]南方医科大学南方医院肿瘤放疗科
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金(30772530);安徽省卫生厅医学科研资助项目(098109)
中文摘要:

目的探讨RNA干扰(RNAi)N—Ras基因增强人肝癌MHCC-97细胞的放射敏感性。方法通过构建干扰N-Ras基因siRNA,采用免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR、Westernblot、MTT法观察RNAi前后肝癌MHCC97-H细胞RNA水平、蛋白水平、生长情况等变化,照射后用细胞克隆计数实验检测放射敏感性变化。结果MHCC97-H细胞株RNAi后mRNA表达抑制率为96.9%±0.159%,RNAi前后差异有统计学意义(t=40.377,P〈0.05),蛋白表达抑制率为89.8%±0.012%,RNAi前后差异有统计学意义(t=31.595,P〈0.05),免疫组织化学显示90%表达被抑制,细胞生长抑制率为21.9%,RNAi前后差异均有统计学意义(F=4.63,P〈0.05)。MHCC97-H细胞RNAi后增敏比(SER)=1.15。结论RNAi肝癌MHCC97一H细胞N—Ras基因可以达到放射增敏的目的。

英文摘要:

Objective To investigate the radiosensitivity of silencing N-Ras by RNA interference in hepatoma carcinoma cell MHCC-97. Methods N-Ras RNA interference (RNAi) vector was constructed by using pcDNA 6.2-GW/EmGFP-mir plamid. The RNAi effect was detected by RT-PCR, Western bolt,immunohistochemisty and MTT method. Survival curve for each cell line were obtained by measuring the clone forming abilities of irradiated cell populations. Results After silencing the N-Ras by RNAi,The expression level of N-Ras mRNA,N-Ras protein, immunohistochemisty were decreased 96.9% ±0.159%(t=40.377,P〈0.05),89.8% ±0.012%(t=31.595,P〈0.05), 90%, respectively, and The survival of hepatoma carcinoma cell MHCC-97 line were inhibited 21.9% ( F = 4.63, P 〈 0. 05 ). Which have significant difference in statistics. The SER of hepatoma carcinoma cell MHCC-97 line after interference was 1.15. Conclusions RNAi targeting silence N-Ras may increase the radiosensitivity of hepatoma carcinoma cell MHCC-97 line.

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期刊信息
  • 《中华放射医学与防护杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:北京市德外新康街2号
  • 邮编:100088
  • 邮箱:cjrmp@cjrmp.sina.net
  • 电话:010-62389620
  • 国际标准刊号:ISSN:0254-5098
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2271/R
  • 邮发代号:18-93
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11741